Лейкоцитарная формула — микроскопическое исследование окрашенного мазка крови. Наверное более корректное название данного исследования не «лейкоцитарная формула», а «Blood smear microscopy» (англ.) - микроскопия мазка крови, так как при данном исследовании производится не только подсчет различных популяций лейкоцитов (бластов, промиелоцитов, миелоцитов, метамиелоцитов, палочкоядерных нейтрофилов, сегментоядерных нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, моноцитов, лимфоцитов, плазматических клеток) и описание их морфологии, но и описываются изменения эритроцитарного ростка крови.

В 2005 году Международный комитет по стандартизации в гематологии (ICSH) утвердил документ подготовленный Международной консенсусной группой по гематологии в котором были определены критерии, при которых необходимо проводить микроскопическое исследование мазка крови, после проведения автоматизированного исследования (Barnes P.W., et al., 2005). Данная группа выделила следующие основные критерии:

• Новорожденные (до 1 месяца).
• Отсутствие одного или нескольких результатов в гемограмме при автоматизированном подсчёте.
• Лейкоциты <4,0 х 109/л или > 30,0 х 109/л (первичное обследование).
• Тромбоциты < 100 х 109/л или > 1000 х 109/л (первичное обследование).
• Гемоглобин < 70 г/л или > 200 г/л (первичное обследование).
• Средний объём эритроцитов (MCV) < 75 фл или >105 фл (первичное обследование).
• Средняя концентрация гемоглобина в эритроците (MCHC) < 300 г/л или > 390 г/л.
• Показатель распределения эритроцитов по объёму (RDW) > 22% (первичное обследование).
• Нейтрофилы (NEU#) <1,0 х 109/л или > 20,0 х 109/л (первичное обследование).
• Лимфоциты (LYM#) > 5,0 х 109/л (взрослые) > 7,0 х 109/л (дети до 12 лет) (первичное обследование).
• Моноциты (MON#) > 1,5 х 109/л (взрослые) > 3,0 х 109/л (дети до 12 лет) (первичное обследование).
• Эозинофилы (EOS#) > 2,0 х 109/л (первичное обследование).
• Базофилы (BAS#) > 0,5 х 109/л (первичное обследование).
• Ретикулоциты >100 х 109/л (первичное обследование).
• Наличие одного или нескольких «флагов» анализатора.

Бласты, миелобласты, промиелоциты, миелоциты, метамиелоциты

В норме в периферической крови не обнаруживаются, их появление возможно при миелопролиферативных и лимфопролиферативных заболеваниях, тяжёлых инфекциях.

Палочкоядерные нейтрофилы

Молодые формы нейтрофилов, имеющие форму ядра в виде палочки. В норме нейтрофилы в крови представлены двумя разновидностями: палочкоядерные нейтрофилы (до 6%) и сегментоядерные нейтрофилы (до 72%).

Сегментоядерные нейтрофилы

Сегментоядерные нейтрофилы характеризуются наличием в цитоплазме гранул двух типов: азурофильных и специфических. Это наиболее многочисленная популяция лейкоцитов (до 72% всех лейкоцитов). Основная функция нейтрофилов состоит в защите организма от инфекций, которая осуществляется главным образом с помощью фагоцитоза.

Эозинофилы

Эозинофильные лейкоциты (эозинофильные гранулоциты), характеризуются наличием в цитоплазме эозинофильных гранул. Эозинофилы участвуют в в реакции организма на паразитарные, аллергические, аутоиммунные, инфекционные и онкологические заболевания.

Базофилы

Базофильные лейкоциты (базофильные гранулоциты), наиболее малочисленная популяция лейкоцитов, содержащая в цитоплазме гранулы. Основной компонент гранул базофилов — гистамин. Базофилы, содержащиеся в крови мигрируют в ткани, где происходит их дифференцировка в тучные клетки. Активированные тучные клетки высвобождают большое количество медиаторов воспаления (гистамин, гепарин). Основная функция базофилов заключается в участии в аллергических реакциях гиперчувствительности немедленного типа.

Моноциты

Популяция самых крупных клеток среди лейкоцитов, образуются в костном мозге из монобластов, по выходу из костного мозга моноциты циркулируют в крови, затем мигрируют в ткани. В тканях моноциты дифференцируются в органоспецифические и тканеспецифические макрофаги. Моноциты — основные клетки клеточного иммунного ответа. Основная их функция состоит в фагоцитозе антигенов и представлении их Т-лимфоцитам хелперам (CD4+).

Лимфоциты

Популяция лейкоцитов, обеспечивающая иммунный надзор, формирование и регуляцию клеточного и гуморального иммунного ответа. Под названием «лимфоциты» объединено несколько популяций клеток, имеющих морфологическое сходство, но различные функции. Образуются в костном мозге, активно функционируют в лимфоидной ткани. Т-лимфоциты (CD3+) определяют состояние клеточного иммунитета, выполняют регуляторные и эффекторные функции. В-лимфоциты (CD19+) участвуют в гуморальном иммунитете, дифференцируются в плазматические клетки, которые в ответ на стимуляцию антигенами выделяют иммуноглобулины.

Атипичные мононуклеары

Атипичные лимфоциты, появляющиеся в крови при инфекционном мононуклеозе. Они характеризуются дисплазией ядра и увеличением цитоплазмы, клетки по виду приобретают сходство с моноцитами, такие клетки называют атипичными мононуклеарами. Наличие таких клеток свидетельствует о инфекционном мононуклеозе, вызванном вирусом Эпштейна-Барр. Атипичные мононуклеары обнаруживают в крови с начала периода клинических проявлений заболевания, их уровень в крови достигает пика к концу 2-ой, началу 3-ей недели заболевания. Атипичные мононуклеары могут обнаруживаться в крови до 4 месяцев после перенесенного заболевания.

Плазматические клетки (плазмоциты)

Плазматические клетки – клетки лимфоидной ткани, продуцирующие иммуноглобулины. В норме в периферической крови плазмоциты обнаруживаются очень редко. Плазматические клетки в периферической крови можно обнаружить при плазмоцитоме, вирусных инфекциях (корь, краснуха, ветряная оспа, инфекционный мононуклеоз, инфекционный гепатит), длительной персистенции антигена (сывороточная болезнь, сепсис, туберкулёз, актиномикоз, коллагенозы, аутоиммунные заболевания), состояниях после облучения, новообразованиях. При обнаружении клеток в результате указывается их количество на 100 просчитанных клеток (например, 1/100 или 5/100).

Несмотря на появление современных гематологических анализаторов микроскопия окрашенного мазка крови является «золотым стандартом» диагностики. Метод исследования лейкоцитарной формулы незаменим при диагностике гематологических заболеваний, так как позволяет обнаружить и описать бласты и юные клетки, заподозрить лейкоз.

• Подозрение на наличие гематологического заболевания.
• Острые и хронические инфекционные заболевания и воспалительные процессы.
• Аллергические, инфекционно-аллергические и паразитарные заболевания.
• Контроль за эффективностью проводимой терапии.
• Наличие критериев для пересчёта лейкоцитарной формулы под микроскопом по результатам автоматизированного исследования крови.

• Кровь рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи).
• За 1-2 дня до исследования исключить из рациона алкоголь, жирное, жареное. Не чем за 1 час до сдачи крови необходимо воздержаться от курения. Перед сдачей крови исключается физическое напряжение (бег, подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. 10-15 минут перед процедурой желательно отдохнуть и успокоиться.
• Не следует сдавать кровь сразу после рентгенологического и ультразвукового обследования, физиотерапевтических процедур, лечебной физкультуры, иглорефлексотерапии, массажа.
• Желательно сдавать кровь до начала приема лекарственных препаратов или не ранее, чем через 10-14 дней после их отмены. При приеме лекарств обязательно надо информироать об этом врача, назначившего анализ.

Кровь берется в вакуумную пробирку с К2ЭДТА или К3ЭДТА (фиолетовая крышка). Для обеспечения правильного соотношения кровь/антикоагулянт пробирка должна заполняться точно до указанного объёма. Сразу после заполнения пробирку необходимо аккуратно перемешать поворачиванием на 180º 8-10 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время взятия материала. Не центрифугировать! Пробирку необходимо отправить в лабораторию в день взятия материала. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Венозная кровь с ЭДТА

Микроскопия окрашенного мазка крови (окраска по Романовскому-Гимза)

Бласты, миелобласты, промиелоциты, миелоциты, метамиелоциты

• В норме в периферической крови не обнаруживаются, их появление возможно при миелопролиферативных и лимфопролиферативных заболеваниях, тяжёлых инфекциях.

Палочкоядерные нейтрофилы

• При патологических процессах (воспаление, инфекции, травмы, миелопролиферативные заболевания) в крови может наблюдаться увеличение числа палочкоядерных нейтрофилов и появление их предшественников (метамиелоциты, миелоциты, промиелоциты, миелобласты).

Атипичные мононуклеары

• В норме не определяются.

Плазматические клетки (плазмоциты)

• В норме в периферической крови плазмоциты обнаруживаются очень редко. Плазматические клетки в периферической крови можно обнаружить при плазмоцитоме, вирусных инфекциях (корь, краснуха, ветряная оспа, инфекционный мононуклеоз, инфекционный гепатит), длительной персистенции антигена (сывороточная болезнь, сепсис, туберкулёз, актиномикоз, коллагенозы, аутоиммунные заболевания), состояниях после облучения, новообразованиях. При обнаружении клеток в результате указывается их количество на 100 просчитанных клеток (например, 1/100 или 5/100).

Результаты исследования лейкоцитарной формулы необходимо оценивать комплексно, т.е. учитывать не только процентное отношение различных популяций лейкоцитов, но и их морфологические изменения, а также морфологические изменения эритроцитов.

При проведении исследования могут выявляться следующие изменения морфологии лейкоцитов: токсигенная зернистость нейтрофилов, вакуолизация цитоплазмы, тельца Князькова-Деле, гиперсегментация ядер нейтрофилов, пельгеровская аномалия, псевдопельгеровская аномалия, клетки лейколиза и др.

Микроскопическое исследование эритроцитов позволяет выявить следующие морфологические изменения: изменение размеров эритроцитов (микроцитоз, макроцитоз, мегалоцитоз, анизоцитоз); изменение формы клеток (пойкилоцитоз, микросфероцитоз, серповидные клетки, мишеневидные клетки, акантоциты, стоматоциты, эллиптоиды, дакриоциты и др.); изменение окраски эритроцитов (гипохромия, гиперхромия). Возможно выявление патологических включений в эритроцитах (кольца Кебота, тельца Жолли, базофильная зернистость, тельца Гейнца-Эрлиха) и др.

При различных заболеваниях изменения лейкоцитарной формулы можно охарактеризовать следующим образом:

• Сдвиг лейкоцитарной формулы влево. Выявляется большое количество палочкоядерных нейтрофилов, возможно появление метамиелоцитов и миелоцитов. Данные изменения возможны при острых воспалительных процессах, гнойных инфекциях, интоксикациях, ацидозе и коматозных состояниях, острых геморрагиях.
• Сдвиг лейкоцитарной формулы влево с омоложением. В мазке крови выявляются метамиелоциты, миелоциты, промиелоциты, миелобласты и эритробласты. Данные изменения возможны при хроническом лейкозе, эритролейкозе, миелофиброзе, остром лейкозе, метастазах новообразований в костный мозг.
• Сдвиг лейкоцитарной формулы вправо. Практически не обнаруживаются палочкоядерные нейтрофилы, выявляются гиперсегментированные нейтрофилы, возможно появление сегментоядерных нейтрофилов с токсигенной зернистостью в цитоплазме. Данные изменения возможны при мегалобластной анемии, болезнях почек и печени, состояниях после переливания крови.

Палочкоядерные нейтрофилы: 1 - 6%

Эозинофилы: 0 - 6%

Базофилы: 0 - 1,0%

• инфекционные заболевания (бактериальные, грибковые, спирохетные, некоторые вирусные, риккетсиозные, паразитарные);
• воспалительные процессы (ревматоидный артрит, панкреатит, дерматит, перитонит, тиреоидит);
• состояние после оперативных вмешательств;
• ишемический некроз тканей (инфаркты внутренних органов: миокарда, почек и т.д.);
• эндогенные интоксикации (сахарный диабет, уремия, эклампсия, некроз гепатоцитов);
• онкологические заболевания (опухоли различных органов);
• приём некоторых лекарственных препаратов (кортикостероиды, препараты наперстянки, гепарин, ацетилхолин);
• отравление свинцом, ртутью, этиленгликолем, инсектицидами; беременность;
• физические и психоэмоциональные нагрузки.

• некоторые инфекционные заболевания, вызванные бактериями (брюшной тиф, паратифы, бруцеллез), вирусами (грипп, корь, ветряная оспа, вирусный гепатит, краснуха), простейшими (малярия), риккетсиями (сыпной тиф);
• затяжные инфекции у пожилых и ослабленных людей;
• заболевания системы крови (гипопластические, апластические и мегалобластные анемии, пароксизмальная ночная гемоглобинурия);
• гиперспленизм;
• врожденные нейтропении;
• синдром Чедиака — Хигаси;
• анафилактический шок;
• тиреотоксикоз;
• воздействие цитостатиков, противоопухолевых препаратов;
• лекарственные нейтропении, связанные с повышенной чувствительностью отдельных лиц к действию некоторых лекарственных средств.

• аллергические заболевания (бронхиальная астма, аллергический ринит, поллинозы, атопический дерматит, экзема, эозинофильный гранулематозный васкулит, пищевая аллергия);
• лекарственная аллергия;
• заболевания кожи (экзема, герпетиформный дерматит);
• паразитарные инвазии (лямблиоз, эхинококкоз, аскаридоз, трихинеллез, стронгилоидоз, описторхоз, токсокароз и т.д.);
• острый период инфекционных заболеваний (скарлатина, ветряная оспа, туберкулез инфекционный мононуклеоз, гонорея);
• злокачественные опухоли;
• заболевания системы крови (лимфогранулематоз, полицитемия, миелопролиферативные заболевания, гиперэозинофильный синдром);
• состояние после спленэктомии;
• воспалительные заболевания соединительной ткани (узелковый периартериит, ревматоидный артрит, системная склеродермия);
• заболевания легких (саркоидоз, легочная эозинофильная пневмония, эозинофильный плеврит, легочный эозинофильный инфильтрат);
• инфаркт миокарда (неблагоприятный фактор).

• начальная фаза воспалительных процессов;
• тяжелые гнойные хронические инфекции;
• шок;
• стресс;
• отравление различными химическими соединениями, тяжелыми металлами.

• ветряная оспа;
• хронический миелолейкоз (эозинофильно-базофильная ассоциация);
• хронические гемолитические анемии;
• болезнь Ходжкина;
• нефроз;
• гиперчувствительность к пищевым продуктам или лекарственным средствам;
• микседема (гипотиреоз);
• язвенный колит;
• лечение эстрогенами, антитиреоидными препаратами.
• Моноциты

• болезни крови (острый моноцитарный и миеломоноцитарный лейкоз, миелопролиферативные заболевания, миеломная болезнь, лимфогранулематоз);
• инфекции (вирусной, грибковой, протозойной и риккетсиозной этиологии);
• период реконвалесценции после острых инфекций;
• туберкулез, сифилис, бруцеллез, саркоидоз;
• системные коллагенозы;
• отравления фосфором, тетрахлорэтаном.

• апластическая анемия;
• волосатоклеточный лейкоз;
• пиогенные инфекции;
• роды;
• оперативные вмешательства;
• шоковые состояния;
• приём глюкокортикоидов.

• заболевания системы крови (хронический лимфолейкоз, лимфомы в период лейкемизации, болезнь тяжелых цепей);
• инфекционные заболевания (инфекционный мононуклеоз, вирусный гепатит, цитомегаловирусная инфекция, коклюш, ОРВИ, токсоплазмоз, герпес, краснуха, ВИЧ-инфекция);
• отравление тетрахлорэтаном, свинцом, мышьяком, дисульфидом углерода;
• действие некоторых лекарственных препаратов (леводопа, фенитоин, вальпроевая кислота, наркотические анальгетики и др.).

• острые инфекционные заболевания;
• милиарный туберкулез;
• лимфогранулематоз;
• системная красная волчанка;
• апластическая анемия;
• почечная недостаточность;
• терминальная стадия онкологических заболеваний;
• иммунодефициты;
• рентгенотерапия;
• приём цитостатиков.

A020 Общий анализ крови CBC/Diff с лейкоцитарной формулой; A050 Ретикулоциты; A060 Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) метод Westergren

1. Долгов В.В. ред. Клиническая лабораторная диагностика: учебник./ М.: ФГБОУ ДПО РМАНПО, 2016: 212-225.
2. Сисла Б. Руководство по лабораторной гематологии./Сисла Б.: пер. с англ. под общ. ред. А.И. Воробьёва.// М.: Практическая медицина, 2011: 352 с.
3. Barnes P.W., McFadden S.L., Machin S.J., Simson E. The International Consensus Group for Hematology Review: Suggested Criteria for Action Following Automated CBC and WBC Differential Analysis. //Laboratory Hematology. 2005; 11: 83-90.
4. Haybar H., Pezeshki S. M. S., Saki N. Evaluation of complete blood count parameters in cardiovascular diseases: An early indicator of prognosis? //Experimental and molecular pathology. 2019; 110: 104-267.
5. Hutchison R.E., McPherson R.A., Schexneider K.I. Basic examination of blood and bone marrow. In: McPherson R.A., Pincus M.R., eds./ Henry's Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 22nd ed.// Philadelphia, Pa: Elsevier Saunders; 2011: chap 30.