Данное исследование основано на взаимодействии инактивированных формалином тромбоцитов с фактором Виллебранда в присутствии антибиотика ристоцетина (ристомицина). Обработанные формалином тромбоциты утрачивают способность к агрегации под действием физиологических индукторов (АДФ, адреналина, коллагена, арахидоновой кислоты, тромбина), но сохраняют способность к ней в присутствии ристоцетина.

Ристоцетин не относится к физиологическим, эндогенным индукторам агрегации. В лабораторных условиях он связывается с одним из участков молекулы Виллебранда и GPIb-V-IХ рецепторами тромбоцитов, что резко увеличивает сродство между фактором Виллебранда и тромбоцитарной мембраной. Добавление ристоцетина и инактивированных формалином тромбоцитов к исследуемой плазме крови ведет к развитию тромбоцитарной агрегации, интенсивность которой зависит от концентрации и функциональной полноценности фактора Виллебранда. Ристоцетин и инактивированные тромбоциты играют при этом роль лабораторных реагентов, позволяющих исследовать активность фактора Виллебранда в образце крови пациента. Соотношение ристоцетин-кофакторной активности и концентрации антигена фактора Виллебранда позволяет получить дополнительную информацию о функциональной полноценности его молекул.

Подозрение на болезнь Виллебранда и необходимость ее диагностики возникает при любом длительном кровотечении, независимо от его локализации (рецидивирующие носовые, десневые, при удалении зубов и оперативных вмешательствах, меноррагии).

Диагноз «Болезнь Виллебранда» устанавливают на основании комплексного обследования, включающего в себя генеалогические данные, оценку клинических проявлений и результатов исследования показателей плазменного и тромбоцитарного гемостаза.

Для тяжелых форм болезни Виллебранда характерно:

• снижение активности фактора Виллебранда;
• снижение прокоагулянтной активности фактора свертывания VIII;
• снижение агрегации тромбоцитов, индуцированной ристоцетином;
• снижение антигена фактора Виллебранда.

Для среднетяжелых и легких форм болезни Виллебранда эти значения вариабельны, поэтому определение их проводится в динамике, с временными интервалами в 3-4 месяца, в результате которых выявляется снижение одного из характерных признаков болезни Виллебранда.

Дифференциальную диагностику типов болезни Виллебранда проводят на основании результатов определения активности и свойств фактора Виллебранда, определения прокоагулянтной активности фактора свертывания VIII и мультимерного профиля фактора Виллебранда. Диагностику подтипа 2В болезни Виллебранда проводят на основании агрегации тромбоцитов, индуцированной ристоцетином с низкими концентрациями ристоцетина. Диагностику подтипа 2N проводят по аномальному связыванию фактора VIII с фактором Виллебранда.

• Диагностика болезни Виллебранда.
• Дифференциальная диагностика болезни Виллебранда и гемофилии А.
• Склонность к повышенной кровоточивости.
• Комплексная диагностика сосудистых нарушений.

Кровь для проведения исследования рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Если пациент получает антикоагулянты, то в направлении необходимо указать препарат и дозы приёма.

При взятии крови жгут рекомендуется накладывать на минимально короткий срок. Кровь берётся в вакуумную пробирку с цитратом натрия (голубая крышка) до метки и сразу перемешивается, поворачиванием на 180º 3-4 раза (Не встряхивать!). Не центрифугировать! Написать на этикетке Ф.И.О. пациента, дату и время. Материал должен быть доставлен в лабораторию в течение 6-8 часов. До передачи курьеру пробирку хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Цитратная плазма

Иммунотурбидиметрия

Единицы измерения: %

Диагностическое значение имеет как снижение, так и повышение ристоцетин-кофакторной активности и ее соотношение с концентрацией фактора Виллебранда. При 1 и 3 типе болезни Виллебранда снижение ристоцетин-кофакторной активности обусловлено исключительно уменьшением концентрации фактора Виллебранда в крови. При 2 типе болезни Виллебранда, характеризующимся качественными изменениям его молекул и уменьшением количества мультимерных форм, ристоцетин-кофакторная активность может снижаться или повышаться непропорционально концентрации фактора Виллебранда. В частности, непропорциональное снижение ристоцетин-кофакторной активности наблюдается при 2А и в особенности 2М типе болезни Виллебранда. 2В тип болезни Виллебранда отличается развитием тромбоцитарной агрегации даже при низкой концентрации ристоцетина.

Чаще всего снижение ристоцетин-кофакторной активности при нормальной концентрации фактора Виллебранда указывает на дефицит в плазме крови его высокомолекулярных форм, обладающих максимальной агрегационной и тромбогенной активностью.

70 - 130%

B723 Фактор свёртываемости VIII, активность в крови; B728 Фактор Виллебранда, антиген (vWF); B699 Протромбиновое время; B701 Тромбиновое время; B705 АЧТВ; B707 Антитромбин III; B703 Фибриноген

1. Система гемостаза. Теоретические основы и клиническая практика : национальное руководство / под ред. Рукавицына О.А., Игнатьева С.В.. - Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2024. - 944 с.
2. Capiau A., De Vleeschauwer J., De Backer T., et al. Optimizing anticoagulation therapy for in-hospital patients on direct oral anticoagulants: a single-centre modified Delphi study. /Br J Clin Pharmacol. 2024 Jul 3. doi: 10.1111/bcp.16159.
3. Fenger-Eriksen C., Kamphuisen P.W., Verhamme P., Jenny J.Y. European guidelines on peri-operative venous thromboembolism prophylaxis: first update: Chapter 5: Mechanical prophylaxis. /Eur J Anaesthesiol. 2024 Aug 1; 41(8):589-593.
4. Mohammed S., Favarolo E.J. Laboratory Testing for von Willebrand Factor Ristocetin Cofactor (VWF:Rco). /Methods Mol Biol. 2017:1646:435-451.
5. Thonon H., Van Nieuwenhove M., Thachil J., et al. Hemostasis Testing in the Emergency Department: A Narrative Review. /Semin Thromb Hemost. 2024 Jun 19. doi: 10.1055/s-0044-1787661.