Определение онкопротеина p16ink4a иммуноцитохимическим методом в цитологических препаратах. Оформляется только как дозаказ, после получения результата цитологического исследования D006 о диспластических изменениях цервикального эпителия!

Белок p16ink4a является маркером истинных диспластических изменений в клетках эпителия цервикального канала и его определение в цитологических препаратах используется как дополнительный метод обследования больных с неоплазиями цервикального эпителия и раком шейки матки.

В норме белок p16ink4a играет важную роль в регуляции клеточного цикла в клетках цервикального эпителия, он блокирует разобщение комплекса E2F-Rb, тем самым не допуская активной пролиферации клеток. E2F-киназа (фермент, активирующий циклин-зависимую киназу) обеспечивает переход клетки из G1 фазы (пресинтетическая) в S фазу (синтетическая) клеточного цикла. В норме E2F-киназа не активна, находясь в связанном состоянии с белком супрессором Rb (белок гена ретинобластомы). В окончательно дифференцированных эпителиальных клетках экспрессия p16ink4a белка подавляется. На сегодняшний день достоверно известно, что причиной ракового перерождения клеток шейки матки является инфицирование женщин вирусом папилломы человека (ВПЧ) генотипами высокого онкогенного риска. Более 20% женщин инфицированы ВПЧ, но только у некоторых из них развиваются клинически подтвержденные диспластические изменения эпителия или рак шейки матки. Механизм канцерогенеза клеток эпителия запускается при целом ряде условий. Ключевым событием является интеграция ДНК вируса ВПЧ в геном клетки, что сопровождается активацией синтеза онкобелков E6 и E7. Белок Е7 вируса папилломы человека высокого онкогенного риска при своем взаимодействии с белком гена ретинобластомы (Rb) приводит к разобщению комплекса Е2F-Rb, E2F остается постоянно в активном состоянии, стимулируя активную пролиферацию клеток, что приводит к экспрессии белка p6ink4a. Иммуноцитохимически это проявляется позитивной реакцией на p16ink4a в диспластически измененном эпителии шейки матки.

Диспластические изменения цервикального эпителия, подозрение на рак шейки матки, выявленные при цитологическом исследовании соскоба шейки матки и цервикального канала

• Рекомендуется не проводить исследование во время месячных.
• Забор материала для цитологического исследования проводится до бимануального исследования и проведения кольпоскопии.

Соскоб шейки матки, цервикального канала производит врач - гинеколог специальной цитощёткой. Вставить центральные щетинки цитощётки в канал шейки матки. Слегка надавливая, провернуть цитощётку два раза по часовой стрелке. Верхнюю часть цитощётки поместить во флакон с с транспортной средой BD SurePath! Пробы без цитощётки на исследование не принимаются. Плотно закрыть крышку флакона. К биоматериалу приложить бланк направления, где обязательно указать учреждение, № пробы, Ф.И.О. пациентки, дату рождения, диагноз и дату последней менструации.

Соскоб из цервикального канала во флаконе с транспортной средой

Иммуноцитохимический

Результат исследования качественный (реакция положительная или отрицательная). Белок p16ink4a является надежным маркером истинных диспластических изменений в клетках эпителия цервикального канала и может быть использован как дополнительный метод обследования больных с дисплазиями и раком шейки матки. Качественное определение онкопротеина p16INK4a, выполняемое цитоиммунохимическим методом позволяет значительно снизить количество неясных цитологических заключений при скрининге (ASCUS, LSIL и др.), помочь в постановке диагноза и оценке риска развития рака шейки матки.

Оценку результата проводит лечащий врач

D006 Исследование соскобов шейки матки, цервикального канала. Метод жидкостной цитологии (Liquid-based cytology)

1. Котов В.А., Раскин Г.А., Протасова А.Э. Применение жидкостной цитологии и иммуноцитохимического определения онкомаркера p16ink4a для скрининга, диагностики и выбора тактики лечения заболеваний шейки матки: учебное пособие. //СПб. 2009. 24 с.
2. Castle P.E., Shaber R., LaMere B.J., et al. Human Papillomavirus (HPV) Genotypes in Women with Cervical Precancer and Cancer at Kaiser Permanente Northern California. //Cancer Epidemiol Biomark Prev 2011; 20: 946.
3. Del Pino M., Garcia S., Fuste V., et al. Value of p16(INK4a) as a marker of progression/regression in cervical intraepithelial neoplasia grade 1. //Am J Obstet Gynecol 2009; 201 (5): 488. e1–7.
4. Redman R., Rufforny I., Liu C., et al. The utility of p16INK4a in discriminating between cervical intraepithelial neoplasia 1 and nonneoplastic equivocal lesions of the cervix. //Arch Pathol Lab Med 2008; 132: 795–799.