Иммуногистохимическое исследование с использованием антител — комплексное исследование биоптатов для идентификации специфичных антигенных свойств злокачественных опухолей, а также для определения вида и подвида онкозаболевания, его распространённости и первичного очага опухоли. В исследовании используют антитела, меченные ферментами или флуоресцентными красителями. При добавлении таких антител к исследуемому образцу ткани они связываются с соответствующими антигенами, образуя комплексы антиген-антитело. Затем, благодаря метке на антителе, эти комплексы визуализируются под микроскопом, что позволяет определить наличие и распределение конкретных молекул в ткани. Существует два основных метода иммуногистохимии: прямой и непрямой:

• прямой - меченые антитела непосредственно связываются с антигенами в ткани;
• непрямой - используют немеченые первичные антитела, которые связываются с антигеном, а затем обнаруживаются с помощью вторичных меченых антител, направленных против первичных.

В основе метода лежит принцип взаимодействия «антиген-антитело». Патологически изменённая ткань имеет антигены, при нанесении на неё меченного антитела образуется иммунный комплекс антиген-антитело. Врач-патологоанатом изучает количество клеток, окрашенных маркером, и определяет их локализацию и структуру, количество гормонов, иммуноглобулинов и энзимов.

На сегодняшний день доступны для использования в клинической диагностической работе более 200 антител, которые можно группировать различным образом. По роли в плане установления диагноза или принятия решения в отношении тактики наблюдения за пациентом, назначения тех или иных препаратов антитела можно разделить на две большие группы: диагностические и предиктивно-прогностические антитела.

К диагностическим антителам относятся:

• эпителиальные, органо/тканеспецифичные маркёры;
• нейроэндокринные маркёры;
• меланоцитарные маркёры;
• мышечные и сосудистые маркёры;
• герминогенные маркёры.

Прогностические и предиктивные антитела - набор иммуногистохимических маркёров, позволяющих охарактеризовать потенциал опухоли и выявить наличие мишеней для терапии: ER, PR, HER2, Ki67, p53, ALK, MMR (MLH1, PMS2, MSH2, MSH6), PD-L1 и др. Оценка каждого маркёра регламентируется специфическими рекомендациями, может зависеть от клона антитела, лекарственного препарата, клинического запроса.

• Определение гистогенеза опухоли, когда при рутинном гистологическом исследовании возникают сложности или сомнения в правильном диагнозе
• Определение степени злокачественности опухоли
• Определение степени распространения опухолевого процесса в лимфатических узлах
• Дифференциальная диагностика предраковых и раковых заболеваний.
• Определение таргетной терапии при ряде злокачественных опухолей.

Специальной подготовки не требуется. На исследование направляет лечащий врач по рекомендации врача-патологоанатома, проводившего первичное гистологическое исследование. К направлению прилагаются все данные пациента: предварительный диагноз, данные проводившихся исследований, проводимая терапия. Иммуногистохимическое исследование следует использовать в качестве дополнения к морфологическому исследованию, результаты не следует интерпретировать изолированно.

На исследование направляются все парафиновые блоки пациента, упакованные в контейнер. В сопроводительном письме указывается вид исследования и прикладывается предыдущее заключение (заключения) патологоанатома.

Парафиновый блок

Иммуногистохимическое исследование с применением тканеспецифичного антитела (пероксидазный и авидин-биотиновый методы)

Результаты иммуногистохимического исследования оценивает врач-патологоанатом. По результатам проведенного исследования врач выдаёт заключение. В заключении врач-патологоанатом отмечает, к каким антителам определено сродство ткани. Дополнительно описывается морфологическая структура образца — какие клетки и в каком количестве присутствуют.

Заключение врача-патологоанатома не является клиническим диагнозом. Интерпретация результатов исследования должна проводиться только лечащим врачом в совокупности со всеми данными диагностики.

D115 Иммуногистохимическое исследование прогностических маркеров (PD-L1, ALK, ROS, EGFR, NTRK) (цена за 1 маркер) с заключение врача-патологоанатома

1. Артемьева А.С., Мурашкина А.А., Рогачев М. В. Иммуногистохимия: основы, методические подходы, группы маркёров. Учебное пособие. /Санкт-Петербург, 2020: 76 с.
2. Fleuren E.D.G., Versleijen-Jonkers Y.M.H., Heskamp S., et al. Theranostic applications of antibodies in oncology. /Mol Oncol. 2014 Jun; 8(4):799-812.