Флюоресцентная гибридизация insitu (FISH) - современный метод цитогенетического анализа, позволяющий определять качественные и количественные изменения хромосом (в том числе транслокации и микроделеции) и используемый для дифференциальной диагностики злокачественных заболеваний крови и солидных опухолей.

Флуоресцентная гибридизация in situ (англ. fluorescence in situ hybridization – FISH) – цитогенетический метод, который применяют для детекции и определения положения специфической последовательности ДНК на метафазных хромосомах или в интерфазных ядрах in situ. FISH также применяют для выявления специфических мРНК в образце ткани (пространственно-временные особенности экспрессии генов в клетках и тканях). Разработанный J. G. Gall и M. Lou Pardue в 1969 г. на основе свойства нуклеиновых кислот комплементарно удваиваться, метод гибридизации in situ позволяет точно определить локализацию практически любой последовательности ДНК или РНК непосредственно в клетке или клеточном ядре, на метафазных хромосомах, растянутых хроматиновых фибриллах и микрочипах. Сам метод многоэтапный, в зависимости от целей и объектов исследования длительность и условия выполнения каждой ступени могут варьироваться.

Благодаря простой процедуре FISH можно выявить специфические для опухоли аномалии. Этот метод применим только для определенных типов зондов. Перестройки генов, например ALK, ROS1, отражающие многочисленные транслокационные партнеры, делеции критических участков, например 1p и 19q, слияния генов, например COL1A1-PDGFB, геномные дисбалансы, например 6p, 6q, 11q, и амплификации, например HER2, являются мишенями для персонализированной онкологии. Подтверждение генетического маркера часто является прямым показанием к началу специфического таргетного лечения. В других случаях обнаруженная аберрация помогает патологам лучше различать саркомы мягких тканей или ставить окончательный диагноз. Нанесение FISH на зафиксированный в формалине образец ткани, пропитанный парафином, позволяет оценить геномный статус в популяции клеток, происходящих из первичной опухоли или метастаза. Хотя доступно множество более сложных методов, таких как ПЦР в реальном времени или секвенирование нового поколения, FISH остается широко используемым методом во многих генетических лабораториях.

• Дифференциальная диагностика злокачественных заболеваний крови и солидных опухолей

Специальной подготовки не требуется. На исследование направляет лечащий врач по рекомендации врача-патологоанатома, проводившего первичное гистологическое исследование. К направлению прилагаются все данные пациента: предварительный диагноз, данные проводившихся исследований, проводимая терапия. Иммуногистохимическое исследование следует использовать в качестве дополнения к морфологическому исследованию, результаты не следует интерпретировать изолированно.

На исследование направляются все парафиновые блоки пациента, упакованные в контейнер. В сопроводительном письме указывается вид исследования и прикладывается предыдущее заключение (заключения) патологоанатома.

Парафиновый блок

Флюоресцентная гибридизация In situ (FISH)

• положительный результат: наличие в исследуемом образце аберрантных хромосом;
• отрицательный результат: отсутствие в исследуемом образце аберрантных хромосом.

Результаты исследования оценивает врач-патологоанатом. По результатам проведенного исследования врач выдаёт заключение. Заключение врача-патологоанатома не является клиническим диагнозом. Интерпретация результатов исследования должна проводиться только лечащим врачом в совокупности со всеми данными диагностики. 

D105 Иммуногистохимическое исследование  HER-2/neu статуса опухоли; D100 Иммуногистохимическое исследование (1 антитело) с заключением врача-патологоанатома

1. Артемьева Е.С., Артемьева А.С., Кушнарев В.А., Рогачев М.В. Флуоресцентные методы исследования, гибридизация in situ: учебное пособие для врачей и обучающихся в системе высшего и дополнительного профессионального образования. /Санкт-Петербург: НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, 2021: 88 с.
2. Chrzanowska N.M., KowaleWski J., Lemandowska M.A. Use of Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) in Diagnosis and Tailored Therapies in Solid Tumors. /Molecules. 2020 Apr 17; 25(8):1864.