Антинуклеарные антитела (аутоантитела к 17 антигенам: нуклеосомы; Sm; Sm/RNP; рибосомы; гистоны; U1-snRNP; SS-A/Ro60; SS-A/Ro52; SS-B/La; Scl-70; PM-Scl; CENP-A/B; PCNA; Jo-1; митохондриям; f-Актину; DFS-70) иммуноблот + антитела к двуспиральной ДНК и антинуклеарный фактор на клеточной линии Hep-2 IgG

Антинуклеарные антитела (ANA) – гетерогенная группа аутоантител, реагирующих с различными компонентами ядра. В настоящее время описано более 100 разновидностей антиядерных антител. Антинуклеарные антитела (ANA) к экстрагируемым ядерным антигенам представляют собой антитела к растворимым компонентам ядра клетки (рибонуклеопротеинам). В норме ANA отсутствуют в организме. При аутоиммунной патологии иммунная система начинает вырабатывать специфические антитела к собственным клеткам организма и их компонентам. Основной метод определения специфичности антител при положительном ANA – это иммуноблотинг, позволяющий дифференцировать системные заболевания соединительной ткани. Данный метод исследования дает возможность одновременно выявить антитела к 17 различным внутриклеточным антигенам, которые могут встречаться как сочетанно, так и изолированно и антитела к 2-спиральной ДНК и антинуклеарный фактор на клеточной линии HEp-2 IgG.

В данной панели представлены следующие внутриклкточные антигены:

• Нуклеосомы - антитела к нуклеосомам – чувствительный маркер системной красной волчанки. Они определяются исключительно при СКВ, нередко осложненной поражением почек (люпус-нефритом).
• Sm (Smith) – антитела к Sm (U1-, U2-, U4-рибонуклеопротеинам) – специфичны для системной красной волчанки (СКВ). Они редко встречаются при других системных заболеваниях соединительной ткани и являются одним из критериев диагностики СКВ. При этом, однако, концентрация anti-Sm не коррелирует с активностью системной красной волчанки.
• Sm/RNP (рибонуклеопротеины) – антитела к Sm/RNP (белковым компонентам ядерных нуклеотидов) обнаруживаются при смешанных заболеваниях соединительной ткани (синдроме Шарпа), реже при системной красной волчанке и других ревматических заболеваниях.
• Рибосомы — антитела к рибосомам (рибосомальному белку Р) встречаются у 10-20% больных с СКВ. Они взаимодействуют с фосфоропротеинами рибосом и встречаются преимущественно у больных СКВ с поражением центральной нервной системы, почек и печени. Их обнаружение специфично для СКВ, протекающей с волчаночным психозом.
• Гистоны - антитела к гистонам представляют собой одну из разновидностей антитуклеарных антител и определяются в основном при системной красной волчанке, являясь ее ранними маркерами.
• U1-snRNP – антитела к U1-snRNP (белковому компоненту малого ядерного нуклеотида – U-1-РНК) обнаруживаются при смешанных заболеваниях соединительной ткани (синдроме Шарпа), реже при системной красной волчанке и других ревматических заболеваниях.
• SS-A/Ro60 — антитела к SS-A/Ro60 направлены на белки, связанные с РНК Y1-Y5 в составе сплайсосомы. Эти антитела наиболее часто обнаруживаются при синдроме Шегрена и системной красной волчанке. При СКВ их продукция ассоциируется с определенным набором клинических проявлений и лабораторных нарушений: светочувствительностью, синдромом Шегрена, гиперпродукцией ревматоидного фактора. Присутствие anti-SS-A в крови беременной женщины связано с высоким риском развития неонатального волчаночного синдрома у ребенка.
• SS-A/Ro52 - антитела к SS-A/Ro52 направлены на белки, связанные с РНК Y1-Y5 в составе сплайсосомы. Эти антитела наиболее часто обнаруживаются при синдроме Шегрена и системной красной волчанке. При СКВ их продукция ассоциируется с определенным набором клинических проявлений и лабораторных нарушений: светочувствительностью, синдромом Шегрена, гиперпродукцией ревматоидного фактора. Присутствие anti-SS-A в крови беременной женщины связано с высоким риском развития неонатального волчаночного синдрома у ребенка.
• SS-B/La — антитела к SS-B/La - это антитела к белку, связанному с РНК-полимеразой-3, выявляются при болезни Шегрена и в начальном периоде системной красной волчанки, развивающейся в пожилом возрасте и ассоциирующейся с низкой частотой развития нефрита.
• Scl-70 — антитела к Scl-70 (антисклеродермальные антитела с молекулярной массой 70 кДа, антитела к топоизомеразе I) чаще появляются при диффузной (40%), реже при ограниченной (20%) форме системной склеродермии, CREST-синдроме. Они высокоспецифичны для склеродермии и являются плохим прогностическим признаком относительно развития легочного фиброза.
• CENT-A/B — антитела к CENT-A/B (антицентромерные антитела) обнаруживаются у больных склеродермией, системной красной волчанкой и ревматоидным артритом. У больных системной склеродермией выявление данных антител указывает на благоприятный прогноз и низкую вероятность поражения внутренних органов.
• PCNA - антитела к PCNA – это антитела к ядерному антигену пролиферирующих клеток, один из высокоспецифичных тестов для выявления системной красной волчанки.
• Jo-1 – антитела к Jo-1 (антитела к гистидин-тРНК-синтетазе) впервые были обнаружены в сыворотке крови больных миозитом. У большинства больных с повышенным уровнем антисинтетазных антител выявляется интерстициальная болезнь легких, феномен Рейно. Данное исследование может быть использовано как прогностический маркер прогрессирования болезни.
• Митохондрии (AMA-M2) – антитела к AMA-M2 – это антитела к антигенам митохондрий М-2, расположенным на внутренней мембране органеллы в виде комплекса ферментов. Данные антитела синтезируются при первичном билиарном циррозе и указывают на его тяжелое течение.
• f-Актин — антитела к f-актину являются маркером аутоиммунного гепатита.
• DFS-70 - белок массой 70 кД был признан антигеном, соответствующие антитела к нему были названы антителами против плотных мелких гранул 70. Было предложено использовать определение анти-DFS-70 антител в качестве подходящего биомаркера для исключения системных аутоиммунных ревматических заболеваний (САРЗ).

Кроме того, при данном исследовании проводится определение антител к двуспиральной ДНК и антинуклеарного фактора на клеточной линии HEp-2.

Некоторые разновидности АНА встречаются при одном заболевании или при перекрестных синдромах. Например, антитела к SS-A и SS-B или к RNP и Sm-антигенам часто выявляются совместно, поскольку входят в один белковый комплекс, выступающий антигеном для данных типов аутоантител.

• Диагностика системных заболеваний соединительной ткани
• Мониторинг течения и оценка прогрессирования ревматических заболеваний
• Дифференциальная диагностика некоторых аутоиммунных заболеваний
• Выявление антинуклеарного фактора и антинуклеарных антител в крови
• Симптомы аутоиммунных заболеваний (длительное повышение температуры тела, потеря массы тела, миалгии, артропатии, фоточувствительность, синдром Рейно, лейкопения и гемолитическая анемия)
• Мониторинг течения системных заболеваний соединительной ткани

Кровь на иммунологические исследования рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Сыворотка крови

Иммуноблот

Единицы измерения: Ед/мл; титр

Результаты данного исследования должны интерпретироваться врачом-ревматологом комплексно, в сочетании с клиническими данными. Системное аутоиммунное заболевание при отсутствии клинической картины не может быть диагностировано только на основании выявления специфичных антинуклеарных антител. Отрицательный результат иммуноблота не исключает системного аутоиммунного заболевания соединительной ткани.

• Иммуноблот: < 1,0 Ед/мл – отрицательный
• Антитела к 2-спиральной ДНК: 0 — 20 Ед/мл
• Антинуклеарный фактор: <1/80 - отрицательный

E040 Антинyклеарный антитела (ANA); E041 Антинуклеарный фактор на HEp-2 клетках (РНИФ); E045 Антитела к 2-спиральной ДНК (anti-dsDNA); E045 Антимитохондриальные антитела (AMA); E044 Антинуклеарные антитела (аутоантитела к 17 антигенам: нуклеосомы; Sm; Sm/RNP; рибосомы; гистоны; U1-snRNP; SS-A/Ro60; SS-A/Ro52; SS-B/La; Scl-70; PM-Scl; CENP-A/B; PCNA; Jo-1; митохондриям; f-Актину; DFS-70) иммуноблот + Антитела к двуспиральной ДНК и Антинуклеарный фактор на клеточной линии Hep-2 IgG

1. Тотолян А.А., Лапин С.В. Методики диагностики аутоиммунных заболеваний./В: Меньшиков В.В., ред. Методики клинических лабораторных исследований. Справочное пособие. Том 2. Клинико-биохимические исследования. Иммунологические исследования.// М.: Лабора, 2009: 235-280.
2. Crow M.K. Etiology and pathogenesis of systemic lupus erythematosus./ In: Firestein G.S., Budd R.C., Gabriel S.E., et al, eds. Kelley's Textbook of Rheumatology. 9th ed.// Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2012: chap 79.
3. Fanouriakis A., Kostopoulou M., Andersen J., et al. EULAR recommendations for the management of systemic lupus erythematosus: 2023 update. /Ann Rheum Dis. 2024 Jan 2;83(1):15-29.
4. Siegel R.M., Lipsky P.E. Autoimmunity. In: Firestein G.S., Budd R.C., Harris E., et al., eds. Kelley's Textbook of Rheumatology. 8th ed. //Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2009: chap 15.
5. Tan E.M. Antinuclear antibodies in diagnosis and management. /Hosp Pract (Off Ed). 1983 Jan; 18(1):79-84.
6. Yang Z., Ren Y., Liu D., et al. Prevalence of systemic autoimmune rheumatic diseases and clinical significance of ANA profile: data from a tertiary hospital in Shanghai, China. /APMIS. 2016 Sep;124(9):805-11.