Клеточный иммунитет — комплекс лабораторных тестов, позволяющих оценить функциональную активность клеточного звена иммунитета.

Центральным органом клеточного иммунитета является тимус, в тимусе происходит созревание и антигеннезависимая дифференцировка T-лимфоцитов. Различают две основные группы T-лимфоцитов: эффекторные цитотоксические (киллеры) и регуляторные (хелперы двух типов и супрессоры). T-хелперы стимулируют пролиферацию и дифференцировку цитотоксических лимфоцитов, B-клеток и образование антител. При попадании в организм возбудителя (антигена), T-лимфоциты с экспонированным на поверхностной мембране Т-клеточным рецептором (TCR) распознают чужеродный антиген, далее под действием активационного сигнала «наивный» Т-лимфоцит дифференцируется до праймированного (Thp) и далее в зависимости от вида возбудителя до Т-хелперов 1 (Th1) или 2 типа (Th2). Эта реакция является ключевой в становлении иммунитета, так как на этой стадии определяется по какому пути – клеточному или гуморальному – пойдет дальнейшее развитие иммунного ответа, что зависит от баланса Th1/Th2.

T-хелперы 1 типа (Th1) экспрессируют дифференцировочные антигены CD3, CD4, CD45Ra. Эти клетки, активаторы клеточного звена иммунитета, продуцируя интерлейкины (ИЛ) 2,3,12, интерферон-гамма и фактор некроза опухолей (TNF), они вызывают активацию цитотоксических T-лимфоцитов и натуральных киллеров (NK), пролиферацию T- и B-лимфоцитов, продукцию цитокинов и синтез IgM, IgG2. Th1 обеспечивают иммунитет против вирусов, внутриклеточных бактерий и онкогенных клеток.

T- хелперы 2 типа (Th2) экспрессируют дифференцировочные антигены CD3, CD4, CD29 и отвечают за кооперацию с B-клетками. Они активируют гуморальный иммунный ответ и аллергическое воспаление, стимулируя продукцию IgA, IgG4 плазматическими клетками. Th2 обеспечивают иммунитет против внеклеточных бактерий и их токсинов. Активация эозинофилов, тучных клеток и стимуляция синтеза иммуноглобулина E (IgE) ведёт к развитию аллергических реакций.

T-супрессоры (цитотоксические) тормозят развитие иммунного ответа, как на собственные, так и на чужие антигены, обеспечивая иммунологическую толерантность. Цитотоксические T-лимфоциты — это эффекторы клеточного иммунного ответа, обеспечивающие разрушение чужеродных клеток.

В комплексное исследование клеточного иммунитета входят следующие тесты: лейкоциты, лимфоциты, T-лимфоциты (CD3+), T-хелперы (CD3/4+), T-цитотоксические (CD3/CD8+), B-лимфоциты (CD19+), NK-клетки (CD16/56+), T-клетки NK (CD3/16/56+).

Т-лимфоциты (CD3+)

Т-лимфоциты ответственны за реализацию реакций клеточного звена иммунитета и осуществляют иммунологический надзор за антигенным гомеостазом организма. Количество T-лимфоцитов — один из наиболее информативных показателей иммунограммы. Развитие любого воспалительного процесса сопровождается практически на всем его протяжении снижением содержания Т-лимфоцитов. Повышение количества Т-лимфоцитов в процессе течения воспалительного процесса является благоприятным признаком и, напротив, высокий уровень Т-лимфоцитов при нерезко выраженных клинических проявлениях воспалительного процесса чаще всего указывает на вялое течение воспалительного процесса с тенденцией к хронизации.

Лейкоцитарно – Т-лимфоцитарный индекс

Вычисляемый показатель, который характеризует соотношение общего количества лейкоцитов к количеству Т-лимфоцитов.

Т-хелперы (CD3/CD4+)

Т-хелперы – клетки, регулирующие силу иммунного ответа организма на чужеродный антиген и контролирующие антигенный гомеостаз организма. Увеличение количества Т-хелперов может свидетельствовать о гиперактивности иммунитета, снижение – об иммунологической недостаточности. Важнейшее значение в оценке состояния иммунной системы имеет соотношение количества T-хелперов и T-цитотоксических лимфоцитов в крови (иммунорегуляторный индекс).

Т-цитотоксические (CD3/CD8+)

Т-цитотоксические – это клетки – индукторы, тормозящие иммунный ответ организма. Они оказывают супрессирующий эффект при воспалительных процессах, вирусных инфекциях и онкологических заболеваниях. Увеличение количества Т-цитотоксических лимфоцитов в крови чаще всего свидетельствует о супрессии иммунного ответа, снижение характерно для гиперактивности иммунной системы. Снижение количества T-цитотоксических лимфоцитов свидетельствует также о недостаточности противоопухолевого иммунитета.

Иммунорегуляторный индекс (CD4/CD8)

Вычисляемый показатель, который характеризует соотношение количества T-хелперов (CD4) к количеству T-цитотоксических лимфоцитов (CD8) в крови. Иммунорегуляторный индекс (ИРИ) имеет важнейшее значение в оценке состояния иммунной системы.

В-лимфоциты (CD19+)

В-лимфоциты – клетки гуморального иммунитета, ответственные за синтез антител. B-лимфоциты образуются в костном мозге из стволовых клеток, где проходят первые этапы дифференцировки. В-лимфоциты в основном находятся в лимфоидных органах, в периферической крови содержится 15-20% B-лимфоцитов. Количество В-лимфоцитов в периферической крови мало изменяется при различных воздействиях, поэтому изменение их количества является одним из важных критериев иммунопатологии.

NK-клетки (CD16/56+)

NK-клетки – естественные киллеры (natural killer), клетки, ответственные за противоопухолевый, противовирусный и трансплантационный иммунитет. Эти клетки обладают спонтанной цитотоксической активностью против различных опухолевых клеток, клеток инфицированных вирусами, обеспечивая первый уровень защиты до включения специфических иммунных механизмов. Этот вид клеток характеризует высокая цитотоксичность и способность продуцировать многие цитокины. Уменьшение количества NK-клеток приводит к развитию онкологических заболеваний и утяжелению течения вирусных инфекций.

T-клетки NK (CD3/16/56+)

Т-клетки NK (CD3/16/56+) составляют до 10% лимфоцитов периферической крови, это клетки-эффекторы, ответственные за противовирусный, противобактериальный и противоопухолевый иммунитет. Эта субпопуляция содержит в своем составе Т-клетки со свойствами естественных киллеров (так называемые T-клетки NK), которые являются активными продуцентами важнейших цитокинов, регулируют адаптивный иммунный ответ, изменяя соотношение Th1/Th2, предотвращают чрезмерное повреждение здоровых тканей при воспалительной реакции. Благодаря наличию перфорина и гранулизина, T-клетки NK способны к киллингу микобактерий и грамотрицательных микроорганизмов.

• Тяжелое течение инфекционных заболеваний
• Хронические или часто рецидивирующие заболевания
• Наличие очагов хронического воспаления
• Аутоиммунные заболевания
• Аллергические заболевания
• Контроль лечения СПИДа

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берется в вакуумную пробирку с К2ЭДТА или К3ЭДТА (фиолетовая крышка). Для обеспечения правильного соотношения кровь/антикоагулянт пробирка должна заполняться точно до указанного объёма. Сразу после заполнения пробирку необходимо аккуратно перемешать поворачиванием на 180º 8-10 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время взятия материала. Не центрифугировать! Пробирку необходимо отправить в лабораторию в день взятия материала. До передачи курьеру хранить при температуре +18 - +25ºС.

Венозная кровь с ЭДТА

Проточная цитометрия

Лейкоциты (см. A010)

Лимфоциты (см. A020)

Лейкоцитарно – Т-лимфоцитарный индекс

Вычисляемый показатель, который характеризует соотношение общего количества лейкоцитов к количеству Т-лимфоцитов. Единицы измерения: Ед

Снижение показателя может свидетельствовать о иммунодефицитном состоянии, повышение показателя — о воспалительном процессе.

Т-клетки NK (CD3/16/56+)

Т-клетки NK (CD3/16/56+) составляют до 10% лимфоцитов периферической крови, это клетки-эффекторы, ответственные за противовирусный, противобактериальный и противоопухолевый иммунитет. Эта субпопуляция содержит в своем составе Т-клетки со свойствами естественных киллеров (так называемые T-клетки NK), которые являются активными продуцентами важнейших цитокинов, регулируют адаптивный иммунный ответ, изменяя соотношение Th1/Th2, предотвращают чрезмерное повреждение здоровых тканей при воспалительной реакции. Благодаря наличию перфорина и гранулизина, T-клетки NK способны к киллингу микобактерий и грамотрицательных микроорганизмов.

Грамотная оценка результатов исследования иммунного статуса позволяет уточнить диагноз заболевания, определить лечебную тактику. При отклонениях в работе иммунной системы больному могут быть назначены иммуностимуляторы, иммуномодуляторы или иммуносупрессоры. Так же может быть проведена заместительная терапия с помощью введения иммунных сывороток, иммуноглобулинов, лейкоцитарной массы, препаратов интерферона.

Оценку исследования необходимо начинать с оценки результатов общего анализа крови и лейкоцитарной формулы. Существуют некоторые общие правила оценки результатов исследования клеточного звена иммунитета:

• комплексный анализ исследования более информативен, чем оценка каждого показателя в отдельности;
• полноценный анализ исследования можно проводить лишь в комплексе с оценкой клинической картины данного больного;
• реальную информацию в исследовании имеют сильные сдвиги показателей, слабые сдвиги лишь позволяют повысить уверенность в правильности оценки;
• анализ исследования в динамике как в диагностическом, так и в прогностическом отношении всегда более информативен, чем однократно проведённое исследование;
• в подавляющем большинстве случаев анализ исследования позволяет сделать лишь ориентировочные, а не безусловные выводы диагностического и прогностического характера;
• наибольшую практическую значимость в исследовании имеют соотношения различных популяций и субпопуляций иммунокомпетентных клеток, а не их абсолютные значения;
• несоответствие сдвигов показателей клеточного иммунитета клинической картине течения заболевания свидетельствует о тяжелом, неблагоприятном развитии процесса.

• Т-лимфоциты (CD3+): 56% – 86%; 0,7х 10⁹/л – 2,7х 10⁹/л
• Лейкоцитарно – Т-лимфоцитарный индекс: 4 – 7 Ед.
• Т-хелперы (CD3/CD4+): 33% - 58%; 0,4 х 10⁹/л – 1,6 х 10⁹/л
• Т-цитотоксические (CD3/CD8+): 13% - 39%; 0,2 х 10⁹/л – 1,1 х 10⁹/л
• Иммунорегуляторный индекс (CD4/CD8): 1,5 – 2,0
• В-лимфоциты (CD19+): 5% - 22%; 0,08 х 10⁹/л – 0,6 х 10⁹/л
• NK-клетки (CD16/56+): 5% - 26%; 0,08 х 10⁹/л – 0,7 х 10⁹/л
• Т-клетки NK (CD3/16/56+): 1% - 5%; 0,01 х 10⁹/л – 0,18 х 10⁹/л

• острый и хронический лимфолейкозы;
• гиперактивность иммунной системы;
• синдром Сезари.

• первичные иммунодефицитные состояния;
• вторичные иммунодефицитные состояния (хронические инфекции, туберкулёз, лепра, СПИД, злокачественные опухоли, тяжёлые ожоги, приём кортикостероидов, лечение цитостатиками, лечение иммунодепрессантами, лучевая терапия);
• T-клеточная лимфома;
• волосатоклеточный лейкоз.

• аутоиммунные заболевания (гемолитическая анемия, иммунная тромбоцитопения, аутоиммунный тиреоидит, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, синдром Шегрена);
• цирроз печени, гепатиты;
• криз отторжения донорских органов.

• первичные иммунодефицитные состояния;
• вторичные иммунодефицитные состояния (хронические инфекции, туберкулёз, лепра, СПИД, злокачественные опухоли, тяжёлые ожоги, приём кортикостероидов, лечение цитостатиками, лечение иммунодепрессантами, лучевая терапия).

• первичные иммунодефицитные состояния;
• вторичные иммунодефицитные состояния (хронические инфекции, туберкулёз, лепра, СПИД, злокачественные опухоли, тяжёлые ожоги, приём кортикостероидов, лечение цитостатиками, лечение иммунодепрессантами, лучевая терапия).

• аутоиммунные заболевания (гемолитическая анемия, иммунная тромбоцитопения, аутоиммунный тиреоидит, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, синдром Шегрена);
• цирроз печени, гепатиты;
• криз отторжения донорских органов.

• аутоиммунные заболевания (гемолитическая анемия, иммунная тромбоцитопения, аутоиммунный тиреоидит, системная красная волчанка, ревматоидный артрит, синдром Шегрена);
• цирроз печени, гепатиты;
• криз отторжения донорских органов.

• первичные иммунодефицитные состояния;
• вторичные иммунодефицитные состояния (хронические инфекции, туберкулёз, лепра, СПИД, злокачественные опухоли, тяжёлые ожоги, приём кортикостероидов, лечение цитостатиками, лечение иммунодепрессантами, лучевая терапия).

• острые бактериальные, грибковые и паразитарные инфекции;
• СПИД (начальный период);
• аутоиммунные заболевания (гемолитическая анемия, иммунная тромбоцитопения, тиреоидит Хасимото, синдром Гудпасчера, системная красная волчанка, ревматоидный артрит);
• инфекционный мононуклеоз;
• хронический лимфолейкоз;
• моноклональная гаммапатия.

• врожденная гипогаммаглобулинемия или агаммаглобулинемия;
• новообразования иммунной системы;
• недостаточность гуморального иммунитета;
• состояние после удаления селезенки;
• лечение цитостатиками и иммунодепрессантами;
• физиологическая гипогаммаглобулинемия у детей 3 – 5 мес.

• активация антитрансплантационного иммунитета.

• онкологические заболевания;
• вторичные иммунодефициты;
• первичные иммунодефициты;
• тяжелые вирусные инфекции;
• лечение цитостатиками, иммунодепрессантами.

• активация антитрансплантационного иммунитета.

• онкологические заболевания;
• вторичные иммунодефициты;
• первичные иммунодефициты;
• тяжелые вирусные инфекции;
• лечение цитостатиками, иммунодепрессантами.

A010 общий анализ крови CBC без лейкоцитарной формулы; A030 Лейкоцитарная формула (микроскопия); E102 Фагоцитарная активность лейкоцитов; E103 НСТ-тест (спонтанный и стимулированный); E105 Гуморальный иммунитет; E106 Интерлейкин-1β (IL-1β); E107 Интерлейкин-6 (IL-6); E108 Интерлейкин-8 (IL-8); E109 Интерлейкин-10 (IL-10); E111 Фактор некроза опухолей - альфа (TNF-α); E130 Интерфероновый статус (сывороточный интерферон, спонтанный интерферон, спонтанный и индуцированный интерферон- α и интерферон-γ)

1. Чеканова Т.А., Манзенюк И.Н. Основные методики иммунологических исследований./В: Меньшиков В.В., ред. Методики клинических лабораторных исследований. Справочное пособие. Том 2. Клинико-биохимические исследования. Иммунологические исследования.// М.: Лабора, 2009: 183-235.
2. Annunziato F., Romagnani C., Romagnani S. The 3 major types of innate and adaptive cell-mediated effector immunity. /J Allergy Clin Immunol. 2015 Mar; 135(3):626-635.
3. Firestein G.S. Mechanisms of inflammation and tissue repair./ In: Goldman L., Schafer A.I., eds. Cecil Medicine. 24th ed.// Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier;2011: chap 47.
4. Goronzy J.J., Weyand C.M. The innate and adaptive immune systems./ In: Goldman L., Schafer A.I., eds. Cecil Medicine. 24th ed. //Philadelphia, Pa: Saunders Elsevier; 2011: chap 44.
5. Pockley G., Foulds G., Oughton J., et al. Immune Cell Phenotyping Using Flow Cytometry. /Curr Protoc Toxicol. 2015 Nov 2: 66:18.8.1-18.8.34.