Тест с использованием ВИЧ Аг/Ат Комбо реагенты (Alinity i HIV Ag/Ab Combo Reagent Kit) является хемилюминесцентным иммуноанализом на микрочастицах (CMIA) для одновременного качественного определения антигена HIV p24 и антител к вирусу иммунодефицита человека типа 1 (HIV-1 группы М и О) и/или 2 (HIV-2) в сыворотке или плазме крови человека на анализаторе Alinity i. Тест применяется в качестве вспомогательного метода диагностики инфекции, вызываемойвирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) - HIV-1 (группы М и О)/HIV-2, а также в качестве скринингового теста с целью предупреждения передачи инфекции HIV-1/HIV-2 реципиентам крови, ее компонентов, а также клеток, тканей и органов. Результат теста не позволяет уточнить, реактивность на какой из перечисленных маркеров выявлена: антиген HIV p24, антитела к HIV-1 или антитела к HIV-2.

Синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД) вызывают два типа вируса иммунодефицита человека, обобщенно называемые ВИЧ (HIV). HIV - этиологический фактор СПИДа. HIV передается при половом контакте, переливании крови и ее компонентов, от матери плоду или новорожденному ребенку. Антитела к HIV практически всегда обнаруживаются у пациентов, больных СПИДом и у HIV-инфицированных при отсутствии симптомов; у больных СПИДом и серопозитивных пациентов инфекция HIV всегда обнаруживается при культивировании или амплификации вирусной РНК и/или провирусной ДНК. Филогенетические исследования подразделяют HIV-1 на группы M (основную), N (не-M, не-O) и O (обособленную). Вирусы группы M распространены по всему миру, являясь причиной глобальной пандемии СПИДа. Напротив, вирусы групп N и O относительно редки и эндемичны для западной части Центральной Африки. Однако инфицирование вирусом группы O было зафиксировано также в Европе и США. HIV-1 группы M состоит из генетических подтипов (A, B, C, D, F, G, H, J и K) и циркулирующих рекомбинантных форм (ЦРФ). Распространение и доминирование подтипов HIV-1 и ЦРФ изменяются в зависимости от географического распределения и регионального доминирования. Все подтипы и многие рекомбинантные штаммы существуют в Африке; штамм CRF02_AG наиболее часто встречается в западной Африке и западной части Центральной Африки, подтипы A, C и D доминируют в восточной части Центральной Африки, а подтип C - в Южной Африке. Подтип В HIV-1 является доминирующим подтипом в США, Европе, Японии и Австралии. Однако в Европе значительный процент новых случаев инфицирования HIV-1 вызывается не-B подтипами. В Азии подтип C выявляется в Индии, а штамм CRF01_AE (прежде именуемый подтипом E) и подтип B - в Таиланде и Юго-Восточной Азии. В Южной Америке преимущественно распространены подтипы B и F. Вирус иммунодефицита человека типа 2 (HIV-2) имеет сходство с HIV-1 по структурной морфологии, геномной организации, тропности к клеткам, цитопатогенетичности, способу передачи и по способности вызывать СПИД. Однако HIV-2 менее патогенный, чем HIV-1, а инфекции HIV-2 имеют более длительный латентный период с более медленным прогрессированием к болезни, более низкими титрами вируса и более низкой скоростью вертикальной и горизонтальной передачи. HIV-2 является эндемичным в Западной Африке, однако инфицирование HIV-2, реже по сравнению с HIV-1, было выявлено в США, Европе, Азии и других регионах Африки. HIV-2 подразделяется на генетические подтипы A-G, при этом наибольший процент инфицирования вызывается подтипами A и B.

Основным иммуногенным белком и антигенной мишенью для серодиагностики инфекции HIV является вирусный (HIV) трансмембранный белок (TMP). Антитела против TMP (анти-TMP) выявляются одними из первых при сероконверсии HIV-инфицированных. Реагирование анти-TMP остается относительно сильным на протяжении всего течения заболевания, что подтверждается практически универсальным присутствием антител против TMP на бессимптомной и симптоматической стадиях инфекции HIV. TMP из HIV-1 групп M и O и HIV-2 представлены в реагентах теста Alinity i HIV Ag/Ab Combo пятью рекомбинантными антигенами и двумя синтетическими пептидами, имеющими последовательности нативного TMP. Серологические исследования указывают на то, что хотя HIV-1 и HIV-2 и имеют большое количество общих эпитопов в ядерных антигенах, гликопротеины оболочки значительно менее кросс-реактивны. Антитела против TMP (или части TMP) вирусного штамма одной из групп или типа могут реагировать хорошо, плохо или не реагировать с TMP (или частью TMP) из вирусного штамма другой группы или типа. Исключение могут составлять антитела против HIV-1 группы N. Вскоре после инфицирования HIV, но еще до сероконверсии, антиген HIV может быть выявлен в образцах сыворотки или плазмы крови. Структурным белком HIV, который наиболее часто используется в качестве маркера антигенемии, является ядерный белок p24. Выявление антигена HIV p24 до сероконверсии позволяет сократить “окно” сероконверсии и улучшить раннюю диагностику инфекции HIV.

Лабораторная диагностика играет решающее значение в постановке диагноза ВИЧ-инфекции, которая в стандартном варианте заключается в обнаружении в сыворотке крови АТ к ВИЧ и АГ вируса методом ИХЛА с последующим подтверждением положительных результатов методом ИБ (иммуноблота) в МГЦ СПИД г. Москвы

• По клиническим данным (постоянные длительные хронические заболевания, необъяснимое снижение веса, слабость и др.).
• Медицинское обследование перед госпитализацией.
• Обследование после случайных половых контактов.
• Обследование наркоманов.
• Обследование беременных.
• Ежегодное медицинское обследование медицинских работников, работников детских дошкольных учреждений.
• Обследование доноров крови и органов.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС. К пробирке обязательно прикладывается направление на исследование, в котором указывается полность. Фамилия, имя, отчество; число, месяц, год рождения и адрес регистрации пациента.

Сыворотка крови

Иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА)

Единицы измерения: Ед

Результат оценивается в единицах коэффициента позитивности: S/CO (signal/cutoff)

• < 1,0 – результат отрицательный
• ≥ 1,0 – результат положительный

Отрицательный результат: антитела к ВИЧ и/или антиген не обнаружены. При оценке результатов определения р24 АГ и АТ к ВИЧ в первые недели после заражения, когда концентрация АГ вируса слишком мала для обнаружения, а АТ к ВИЧ еще не выработаны (период серологического окна), отрицательный результат исследования не свидетельствует однозначно об отсутствии вируса. У отдельных лиц период серологического окна может затянуться на несколько месяцев, поэтому при наличии данных, свидетельствующих о контакте обследуемого с инфицированными ВИЧ, рекомендуют проведение повторных исследований через 2-3 месяца. Ложноотрицательные результаты выявления АТ к ВИЧ могут быть получены также в терминальной стадии болезни, характеризующейся тяжелым поражением иммунной системы с глубоким нарушением процесса образования антител.

Положительный результат: антитела к ВИЧ и/или антиген обнаружены. Положительный результат, полученный методом ИХЛА, указывает на вероятность заражения ВИЧ-инфекцией, но иногда этот результат может быть ложноположительным при наличии у пациента ряда хронических заболеваний – онкологических, аллергических, аутоиммунных, а также во время беременности и вскоре после проведенной вакцинации. В случае получения положительного результата исследование повторяется еще два раза и выполняется с помощью того же набора реагентов. В случае получения суммарно двух положительных результатов сыворотка пациента отправляется в референсную лабораторию, где для подтверждения результата проводится исследование образца методом ИФА при использовании набора реагентов другого производителя. Если получен отрицательный результат, то сыворотка тестируется с помощью третьего набора реагентов. При получении положительного результата сыворотка анализируется методом ИБ. В случае получения положительного результата в ИБ пациент направляется к врачу-инфекционисту уполномоченной медицинской организации, которой обычно является центр по профилактике и борьбе со СПИД. При получении отрицательного или сомнительного результата при проведении ИБ биологический образец рекомендуется проанализировать методом ИФА для обнаружения р24 антигена ВИЧ или методом ПЦР для обнаружения РНК/ДНК ВИЧ.

В Российской Федерации порядок проведения исследования на наличие антител к ВИЧ строго регламентирован Санитарными правилами и норммами СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней», утверждеными Постановлением Главного Государственного санитарного врача Российской Федерации №4 от 28.01.2021.

Диагноз ВИЧ-инфекции ставит врач МГЦ СПИД на основании лабораторных данных, данных других исследований и клинической картины заболевания.

Отрицательный (<1,0)

Иммунный блот в МГЦ СПИД г. Москвы

1. Министерство здравоохранения Российской Федерации. Клинические рекомедации. ВИЧ-инфекция у взрослых. 2024: 102 с.
2. Санитарные правила и нормы СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней». / Утверждены Постановлением Главного Государственного санитарного врача Российской Федерации №4 от 28.01.2021.
3. Dybul M., Fauci A.S., Bartlett J.G., et al. Guidelines for using antiretroviral agents among HIV-infected adults and adolescents. /Ann Intern Med. 2002 Sep 3; 137(5 Pt 2):381-433.
4. Glasner P.D., Kaslow R.A. The epidemiology of human immunodeficiency virus infection. /J Consult Clin Psychol. 1990 Feb; 58(1):13-21.
5. Updated recommendations on HIV preventation, infant diagnosis, antiretroviral innitiation and monitoring. /Guidelines World Health Organization, march 2021: 84 p.