Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита C проводится при положительном или сомнительном результате исследования на антитела к вирусу гепатита C в скрининговой тест-системе.

Геном вируса гепатита C – одиночная цепь РНК, разделён на зоны, в которых заключена информация о структурных и неструктурных белках вируса. Структурная зона представлена следующими участками: core – кодируют ядерные белки; E1 и E2 (NS1 - у некоторых авторов) — отвечают за синтез оболочечных белков вируса. Неструктурная зона также разделена на участки: NS2, NS3, NS4a, NS4b, NS5a, NS5b, которые содержат информацию о ферментах, определяющих жизнедеятельность вируса. К настоящему времени обнаружено 6 вариантов генотипа и большое количество субтипов вируса. В одной географической зоне могут доминировать несколько генотипов. В связи с этим, современные тест-системы для определения антител к вирусу гепатита C имеют 4-6 моноклональных антител к разным структурным эпитопам вируса, но даже это не гарантирует, что у больного может быть очередная модификация вируса, в которой не будет нужных эпитопов. В данном случае, несмотря на заражение вирусом, результат исследования антител к вирусу будет отрицательным.

В случае получения положительного результата при исследовании на антитела к вирусу гепатита C в скрининговой тест-системе, для подтверждения его специфичности используют подтверждающий тест - определение широкого спектра антител к структурным и неструктурным белкам специфичным для вируса гепатита С (сore, NS3, NS4, NS5) в сыворотке крови больного. Учёт результатов анализа сывороток проводиться раздельно к каждому антигену вируса. Для каждого антигена рассчитывается коэффициент позитивности (КП). Результат подтверждающего исследования считается положительным, если значение КП ≥ 1: для core антигена и/или для любых двух NS-антигенов. Если положительная реакция получена только к одному из неструктурных белков (NS), результат исследования расценивается как неопределённый (сомнительный).

• Подтверждение положительного или сомнительного результата исследования на антитела к вирусу гепатита С при скрининге.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Сыворотка крови

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Единицы измерения: тест качественный

При получении положительного результата в подтверждающем тесте, выдается ответ : суммарные антитела к вирусу гепатита С - результат «положительный», подтверждающий тест - результат «положительный» с обязательным указанием в коментарии к каким белкам вируса (core, NS3, NS4, NS5) выявлены антитела.

При получении отрицательного результата в подтверждающем тесте, выдается ответ: суммарные антитела к вирусу гепатита С - результат «отрицательный». Это означает или раннюю стадию заболевания или вероятность каких-либо неспецифических влияний компонентов сыворотки крови обследуемого (например, присутствие лекарственных препаратов, онкологические заболевания, хронические инфекционные или инфекционно-аллергические заболевания).

При получении неопределённого (сомнительного) результата в подтверждающем тесте, выдается ответ : суммарные антитела к вирусу гепатита С - результат «положительный», подтверждающий тест - результат «сомнительный» с обязательным указанием в коментарии к какому белку вируса выявлены антитела. В данном случае рекомендуется повторить исследование на антитела к вирусу гепатита C через 2-3 недели.

E281 Антитела к вирусу гепатита C (anti-HCV) суммарные (ИХЛА); E295 Подтверждающий тест на антитела к вирусу гепатита C (anti-HCV immunoblot confirmatory)

1. Клинические рекомендации – Хронический вирусный гепатит C –2021-2022-2023 (14.02.2022) – Утверждены Минздравом РФ. 2021: 49 с.
2. Kanwal F., Lok A.S., El-Serag H.B. CDC and USPSTF 2012 recommendations for screening for hepatitis C virus infection: overview and take-home messages. /Clin Gastroenterol Hepatol. 2013 Mar; 11(3):200-203.