Антитела к ядерному антигену вируса Эпштейна-Барр (EBNA) IgG – появляются в крови через 4-6 месяцев после инфицирования, затем их титр уменьшается и сохраняется в течение всей жизни, маркёр перенесенной Эпштейна-Барр вирусной инфекции.

Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) – Human gammaherpesvirus 4 – ДНК-содержащий вирус, принадлежит семейству Herpesviridae, подсемейству Gammaherpesvirinae, роду Lymphocryptovirus. Выделяют А и В штаммы вируса. Они встречаются в разных географических зонах, но существенных различий между самими штаммами и характером заболевания, вызываемого ими, пока не выявлено. В процессе репликации ВЭБ экспрессируется свыше 70 различных вирусоспецифических белков, из них выделяют несколько групп иммуногенных, определение антител к которым имеет большое значение для диагностики ВЭБ-инфекции и дает возможность различать острую и перенесенную инфекцию, а также ее реактивацию, дифференцировать стадии инфекционного процесса:

• VCA (Viral capsid antigen) – капсидный антиген, кодируемый генами BCLF-1 и BALF-4;
• EA (Early antigen) – ранний антиген, кодируемый генами ВHRF-1 и BMRF-1;
• EBNA (Epstein-Barr nuclear antigen) – ядерный антиген, кодируемый геном EBNA-1;
• LMP (Latent membraneprotein) – латентный мембранный белок, кодируемый генами LMP-2A/B, LMP-1.

Заболевание передаётся преимущественно воздушно-капельным путем, детям чаще всего вирус передается через слюну, при этом инфекция у них часто протекает бессимптомно или субклинически. Второй пик инфицирования наблюдается у молодых людей в возрасте от 14 до 20 лет. В 2/3 случаев может развиться инфекционный мононуклеоз (железистая лихорадка Пфейффера, «болезнь поцелуев»). Инфекция, вызываемая ВЭБ – одна из самых распространенных в мире, к 40 годам более 90% населения имеют специфические IgG-антитела к вирусу. Как правило, первичное инфицирование происходит в детском или подростковом возрасте.

Клинические симптомы заболевания – потеря аппетита, усталость, лихорадка, сыпь, фарингит, тонзиллит, лимфангит, лейкоцитоз, головные боли, ревматические боли и нарушения работы печени. В некоторых случаях могут возникать серьезные осложнения, такие как гемолитическая анемия, пневмония, неврологические или кардиологические нарушения. ВЭБ персистирует на протяжении всей жизни в В-лимфоцитах и отдельных клетках эпителия. Более 90% взрослых людей сероположительны и являются вирусоносителями ВЭБ. В рутинной практике врачей, к которым обращаются, взрослые пациенты в основном встречается хроническая форма ВЭБ-инфекции, которая развивается в среднем у 20% лиц после острой фазы.

Для диагностики ВЭБ-инфекции и инфекционного мононуклеоза методом иммуноферментного анализа проводится определение антител к антигенам ВЭБ, что позволяет провести достоверную лабораторную диагностику инфекции и определить период инфекционного процесса. Дополнительными исследованиями являются общий анализ крови, лейкоцитарная формула (микроскопия) и СОЭ. При инфекционном мононуклеозе возможен лейкоцитоз, лимфоцитоз, появление атипичных мононуклеаров и ускорение СОЭ. Антитела класса IgG к ядерному антигену (EBNA) ВЭБ появляются через 4–6 месяцев после первичной инфекции, затем их титр уменьшается. IgG-антитела к EBNA вируса можно обнаружить у более 50% подростков и более 90% взрослых людей. Антитела класса IgG к EBNA ВЭБ выявляются в крови через несколько недель или месяцев после начала заболевания и сохраняются в течение нескольких лет (в некоторых случаях пожизненно). У пациентов с симптомами инфекционного мононуклеоза выявление IgG-антител к EBNA наряду с обнаружением IgM- и IgG-антител к VCA, помогает отличить раннюю стадию выздоровления от острой фазы мононуклеоза. Возрастание титра IgG-антител к VCA указывает на острую фазу инфекции, тогда как возрастание титра IgM-антител к VCA может свидетельствовать о переходе от ранней к острой фазе. Снижение же титра IgM-антител к VCA может свидетельствовать о переходе от острой фазы к ослаблению инфекции. Наличие IgG-антител к EBNA у здоровых людей указывает на контакт с ВЭБ в прошлом, тогда как наличие IgG-антител к VCA может свидетельствовать как о латентной первичной инфекции, так и о контакте с вирусом в прошлом. Одновременное определение сразу трех маркеров (VCA IgM, VCA IgG и EBNA IgG), как правило, позволяет дифференцировать острую инфекцию и наличие перенесенной ВЭБ-инфекции у иммунокомпетентных пациентов.

• Лабораторное подтверждение диагноза инфекционного мононуклеоза.
• Оценка стадии заболевания.
• Оценка эффективности лечения.
• В комплексе диагностики лимфопролиферативных и онкологических заболеваний, связанных с ВЭБ.
• Эпидемиологические обследования.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Сыворотка крови

Иммуноферментный анализ (ИФА)

Единицы измерения: Ед (коэффициента позитивности)

Результат оценивается в единицах коэффициента позитивности:

• < 0,8 – результат отрицательный
• 0,8 - 1,0 – результат сомнительный
• ≥ 1,0 – результат положительный

Положительный результат указывает на перенесенную в прошлом ВЭБ-инфекцию.

Отрицательный результат исследования не всегда позволяет исключить недавнюю или прошлую инфекцию, за исключением случаев, когда результаты исследования пробы на наличие IgM- и IgG-антител к капсидному антигену также отрицательны. У пациентов с острой стадией инфекции рост титра IgG-антител к ядерному антигену обычно указывает на прогрессирование ранней стадии выздоровления. Если, несмотря на отрицательный результат, остаётся подозрение о возможности инфицирования, необходимо провести повторное исследование через 1-2 недели.

Сомнительный результат обычно является показателем прошлого контакта с ВЭБ в случае, если результат тестирования на наличие IgM-антител к капсидному антигену отрицателен, или же показателем острой инфекции, если IgM-антитела к капсидному антигену всё ещё обнаруживаются в крови. Для клинической интерпретации результатов необходимо провести дополнительные серологические исследования.

Интерпретация результатов исследований серологических маркёров ВЭБ-инфекции и определения ДНК вируса в крови и слюне представлена в таблице.

Интерпретация результатов исследований при ВЭБ-инфекции

Примечание: «-» - отрицательный результат тестирования; «+» - положительный результат тестирования.

Отрицательный (<0,8)

E370 Антитела к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр (VCA) IgM; E371 Антитела к капсидному антигену вируса Эпштейна-Барр (VCA) IgG; E373 Антитела к раннему антигену вируса Эпштейна-Барр (EA) IgG; G045 Вирус Эпштейна-Барр (EBV), обнаружение ДНК; G046 Вирус Эпштейна-Барр (EBV), обнаружение ДНК (количественно); G154 Вирус Эпштейна-Барр (EBV), обнаружение ДНК (количественно); G155 Вирус Эпштейна-Барр (EBV), обнаружение ДНК; A020 Общий анализ крови CBC/Diff с лейкоцитарной формулой (5 фракций лейкоцитов); A040 Лейкоцитарная формула (микроскопия)

1. Домонова Э.А., Шипулина О.Ю. Инфекция, вызываемая вирусом Эпштейна-Барр. // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Акимкина В.Г., Твороговой М.Г. - Москва. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2020: 93-97.
2. Матосова С.В., Домонова Э.А., Шипулина О.Ю. Вирус Эпштейна-Барр // Молекулярная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Покровского В.И., Твороговой М.Г., Шипулина Г.А – М.: Рипол Классик, 2018: 514-521.
3. Niedobitek G., Meru N., Delecluse H.J. Epstein-Barr virus infection and human malignancies. /Int J Exp Pathol. 2001 Jun; 82(3):149-170.
4. Rostgaard K., Balfour H.H., Jarrett R., et al. Primary Epstein-Barr virus infection with and without infectious mononucleosis. /PLoS One. 2019 Dec 17; 14(12):e0226436.
5. Vetsika E-K., Callan M. Infectious mononucleosis and Epstein-Barr virus. /Expert Rev Mol Med. 2004 Nov 5; 6(23):1-16.