Антитела к Treponema pallidum IgG (иммуноблот) – современный метод диагностики сифилиса, самый достоверный высокочувствительный метод идентификации IgG-антител к отдельным белкам Treponema pallidum.

Сифилис – передающееся половым путем заболевание, которое вызывает бледная спирохета (Treponema pallidum). Заболевание начинается с появления безболезненной язвы в месте внедрения возбудителя (твердого шанкра) и регионарного лимфаденита. Через некоторое время инфекция становится генерализованной: развивается вторичный, а затем третичный сифилис. Для диагностики сифилиса наиболее широко используются серологические методы, позволяющие обнаруживать иммунные сдвиги (появление антител) в организме больного в ответ на размножение в нем возбудителя болезни. Наработка специфических антител при заболевании происходит в соответствии с общими закономерностями иммунного ответа: вначале вырабатываются антитела класса IgМ, по мере развития болезни начинает преобладать синтез IgG-антител. IgM-антитела появляются на 2-4-й неделе после заражения и исчезают у нелеченных больных примерно через 18 месяцев, при лечении раннего сифилиса – через 3-6 месяцев, позднего – через 1 год. IgG-антитела появляются обычно на 4-й неделе после заражения и достигают более высоких титров, чем IgМ. Они могут длительно сохраняться даже после клинического излечения больного. Антитела могут быть неспецифическими (реагины) и специфическими (противотрепонемными). Реагины направлены против липидных антигенов бледной трепонемы и против аутоантигенов, возникающих вследствие деструкции клеток больного. Уровень реагинов может повышаться при различных физиологических и патологических состояниях, поэтому такие реагины могут стать причиной ложноположительных серологических реакций на сифилис. Специфические антитрепонемные антитела направлены против антигенов бледной трепонемы.

Лабораторная диагностика сифилиса регламентирована приказом МЗ РФ № 87 от 26.03.2001 г. «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса», в котором утверждены методические указания по постановке отборочных и диагностических тестов на сифилис. В серологической диагностике сифилиса, в связи с особенностями иммунного ответа на эту инфекцию, используют сочетание неспецифических (нетрепонемных) и специфических по отношению к антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum (трепонемных) тестов. Таким образом, последовательность обследования пациентов на сифилис представляется следующим образом:

При первичном обследовании производится постановка отборочного (скринингового) теста, в частности RPR (неспецифический антифосфолипидный тест), современный аналог реакции Вассермана и в случае положительного результата – любого специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, ИХЛА).

После окончания терапии ставится RPR и по снижению титра судят о динамике инфекционного процесса и эффективности терапии. Подтверждением эффективности проведенной терапии считается снижение титра в 4 и более раз в течение 1 года.

По окончании этого срока осуществляется постановка специфического подтверждающего трепонемного теста (РПГА, ИФА, ИХЛА). Следует учитывать, что специфические трепонемные тесты могут оставаться положительными в течение ряда лет, а в отдельных случаях остаются положительными на всю жизнь.

IgG-антитела к Treponema pallidum появляются в крови через 3–4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и достигает максимума на 6-й неделе, в этот момент их концентрация преобладает над концентрацией IgM-антител. IgG-антитела на определённом уровне сохраняются длительное время, иногда пожизненно. Исследование IgG антител к антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum методом иммуноблота используют в качестве дополнительного специфического трепонемного теста при необходимости углубленного исследования при неубедительных результатах скрининговых и подтверждающих тестов диагностики сифилиса. Тест основан на методе Western blot. В ходе исследования выявляют наличие в сыворотке пациента антител класса IgG к антигенам возбудителя сифилиса Treponema pallidum. В ходе исследования определяются следующие IgG-антитела к TpN47; TmpA; Р 22; TpN17; TpN15.

• Углублённое обследование при положительном и/или неопределённом результате исследования на IgG-антитела в скрининговом тесте.

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берётся в вакуумную пробирку с активатором свертывания и сепарирующим гелем (красная/желтая крышка), сразу после заполнения пробирку необходимо перемешать, поворачивая на 180º 5-6 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время. Затем пробирке следует дать постоять 20-30 минут при комнатной температуре (для образования сгустка). Отцентрифугировать при 3500 об/мин (2000g) – 10 минут, не позднее, чем через 2 часа после взятия. Пробирку передать в лабораторию в день взятия. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Сыворотка крови

Иммуноблотинг (Western blot)

Единицы измерения: тест качественный

Исследование на IgG- антитела к отдельным антигенам Treponema pallidum играет важную роль в диагностике первичного, вторичного, третичного и латентного сифилиса. Для подтверждения ранее диагностированного инфицирования T. pallidum рекомендуется определение IgG-антител через один-два месяца после обнаружения IgM-антител, но обязательно в свежем образце крови. По некоторым данным, IgG-антитела класса к Tp17, Tp45 и Tp47 обнаруживаются при первичном сифилисе на его более поздних стадиях. Анти-Tp45 и анти-Tp47 IgG-антитела чаще встречаются при латентной форме сифилиса. Через 24 месяца после проведенной патогенетической терапии у пациентов с первичным и вторичным сифилисом IgG-антитела класса методом иммуноблотинга не детектируются.

E431 антитела к Treponema pallidum (суммарные) ИХЛА; E435 Антитела к Treponema pallidum IgM; E440 Антитела к Treponema pallidum (суммарные) РПГА; E445 RPR сифилис (антикардиолипиновый тест); E446 Антитела к Treponema pallidum IgM (методом Western blot); G212 Treponema pallidum, обнаружение ДНК

1. Клинические рекомендации. Сифилис. Общероссийская общественная организация «Российское общество дерматовенерологов и косметоглогов» (утв. Минздравом России), 2020. – 102 с.
2. Приказ Министерства Здравоохранения Российской Федерации № 87 от 26.03.2001 г. «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса». Приложение №1. Методические указания «Постановка отборочных и диагностических тестов на сифилис».
3. Соколовский Е.В., Красносельских Т.В., Рахматулина М.Р. Федеральные клинические рекомендации по ведению больных сифилисом. Российское общество дерматовенерологов и косметологов, 2015. - 45 с.
4. Clement M.E., Okeke N.L., Hicks C.B. Treatment of syphilis: a systematic review. /JAMA. 2014 Nov 12; 312(18):1905-1917.
5. Marra C.M., MaxWell C.L., Dunaway S.B., et al. Cerebrospinal Fluid Treponema pallidum Particle Agglutination Assay for Neurosyphilis Diagnosis. /J Clin Microbiol. 2017 Jun; 55(6):1865-1870.
6. Van Voorst Vader P.C. Syphilis management and treatment. /Dermatol Clin. 1998 Oct;16(4): 699-711
7. Workowski K.A., Berman S. Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Sexually transmitted diseases treatment guidelines, 2010.// MMWR Recomm Rep. 2010; 59: 1-110.