ДНК вируса гепатита B в крови – является доказательством инфицированности вирусом гепатита В. ДНК вируса гепатитаВ появляется в крови в среднем через месяц после инфицирования и является первым диагностическим маркером гепатита В. HBsAg появляется в крови заболевшего позже.

Гепатит В - заболевание печени, которое вызывается ДНК-содержащим вирусом гепатита В (HBV) (семейство Hepadnaviridae). Вирус гепатита В состоит из оболочки и нуклеокапсида. Оболочка содержит поверхностный антиген – “s” (HBsAg). В нуклеокапсиде находятся ядерный антиген – “core” (HBcAg) и антиген “e” (HBeAg), а также ферменты и ДНК вируса. В ходе иммунного ответа во время заболевания к антигенам оболочки и ядра вируса образуются различные антитела.

Эта вирусная инфекция широко распространена, о чем свидетельствует повсеместная, но неравномерная заболеваемость острым и хроническим гепатитом В. Вирус гепатита В передается парентеральным путем, при переливании крови и ее продуктов, при половом контакте, а также от матери новорожденному, особенно при инфицировании матери в третьем триместре. Инкубационный период составляет от 30 до 180 дней, в среднем 70 дней. Заболевание протекает либо бессимптомно, либо с развитием тяжелой формы гепатита. У большинства взрослых инфицированных вирусом гепатита B (более 90%) развивается острая инфекция, которая проявляется синдромом желтухи и нарушением функции печени и заканчивается полным выздоровлением, инфекция редко переходит в хроническую форму.

Этиологическая лабораторная диагностика заболевания включает в себя определение поверхностного антигена вируса (HBsAg) и е-антигена (HBeAg), антител к ним (анти-HBs, анти-HBe), антител к ядерному антигену (анти-HBc IgM, анти-HBc IgG), выявление и количественное определение ДНК вируса гепатите В. Выявление ДНК вируса гепатита В в крови является доказательством инфицированности вирусом гепатита В. ДНК вируса гепатита В появляется в крови в среднем через месяц после инфицирования и является первым диагностическим маркером гепатита В. HBsAg появляется в крови заболевшего позже. Проведение исследования обнаружения ДНК вируса гепатита В в крови позволяет клиницистам:

• проводить раннюю диагностику острого гепатита В;
• выявлять скрытые формы гепатита В;
• выявлять мутантные по HBsAg штаммы вируса гепатита В.

Обнаружение ДНК вируса гепатита В выполняют методом ПЦР. Для мониторинга противовирусной терапии необходимо использовать так называемые ультрачувствительные тесты. Обнаружение в крови ДНК вируса гепатита В свидетельствует об инфицированности вирусом гепатита В. Отсутствие в крови ДНК вируса гепатита В свидетельствует об отсутствии инфекции.

Лечение хронического гепатита В проводят с применением аналогов нуклеозидов / нуклеотидов. Вирусологический ответ на лечение оценивают на 48 неделе приема препаратов. Отсутствие ДНК вируса гепатита В в крови свидетельствует о достижении вирусологического ответа. Обнаружение в крови ДНК вируса гепатита В свидетельствует о том, что вирусологический ответ не достигнут.

Определение концентрации ДНК вируса гепатита В в крови (вирусная нагрузка) при гепатите В измеряется в международных единицах на мл (МЕ/мл), в условиях калибровки с использованием признанного международного стандарта, или в копиях/мл. Определение концентрации ДНК вируса гепатите В в крови используется для определения различных стадий хронического гепатита В и мониторинга эффективности противовирусной терапии. Поскольку при лечении хронического гепатита В полная эрадикация вируса практически невозможна, целью лечения является снижение риска развития неблагоприятных исходов заболевания (цирроза печени или гепатоцеллюлярной карциномы), что может быть достигнуто при стойком подавлении репликации вируса. Именно поэтому основным критерием оценки ответа на лечение является уровень ДНК вируса гепатите В в крови, который отражает активность репликации вируса в клетках печени. Вирусная нагрузка в плазме крови в совокупности с другими маркерами позволяет определить стадию заболевания при хронизации инфекции, вызванной вирусом гепатита В. Количественное исследование ДНК вируса гепатита В в крови является обязательным исследованием до начала и в процессе противовирусного лечения для оценки его эффективности. При использовании препаратов с высоким генетическим барьером (энтекавир, тенофовир) необходимо проводить исследование уровня ДНК вируса гепатита В каждые 3-4 месяца в течение первого года терапии и каждые 6-12 месяцев, начиная со второго года лечения. В зависимости от полученных результатов терапия выбранным препаратом продолжается, или проводится корректировка схемы лечения.

Следовательно, количественное определение ДНК вируса гепатита B в крови является важнейшим тестом, который в совокупности с другими лабораторными тестами позволяет диагностировать инфекцию, определить характер инфекционного процесса, оценить необходимость проведения терапии и её эффективность.

• Пациенты, у которых выявлен HbsAg
• Больные хроническим гепатитом В до начала противовирусной терапии и во время ее прове- дения
• Больные хроническим гепатитом В, находящиеся на противовирусной терапии, с подозрением на вирусологический рецидив, тестируются через 1 меяц после нарастания концентрации ДНК вируса гепатита В без отмены противовирусного препарата

Кровь на исследование рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи). Желательно за 1-2 дня до проведения исследований исключить из рациона питания жирную, жареную пищу и алкоголь.

Кровь берется в вакуумную пробирку с К2ЭДТА или К3ЭДТА (фиолетовая крышка). Для обеспечения правильного соотношения кровь/антикоагулянт пробирка должна заполняться точно до указанного объёма. Сразу после заполнения пробирку необходимо аккуратно перемешать поворачиванием на 180º 8-10 раз (Не встряхивать!). Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время взятия материала. Не центрифугировать! Пробирку необходимо отправить в лабораторию в день взятия материала. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Кровь с ЭДТА

ПЦР Real time

Единицы измерения: Lg (копий /мл); Lg (МЕ/мл)

Диапазон определяемых концентраций от 2,0 до 8,0 х Lg (МЕ/мл). Результат исследования выражается в десятичных логарифмах: Lg (МЕ/мл); Lg (копий/мл).

Не обнаружена

E245 Поверхностный антиген вируса гепатита B (HbsAg) (ИФА); E246 Поверхностный антиген вируса гепатита B (HbsAg) (ИХЛА); G010 Вирус гепатита B (HBV), обнаружение ДНК (количественно)

1. Клинические рекомендации – Острый гепатит B (ГB) у взрослых –2021-2022-2023 (14.09.2021) – Утверждены Минздравом РФ. 2021: 50 с.
2. Санитарные правила и нормы СанПиН 3.3686-21 «Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике инфекционных болезней». / Утверждены Постановлением Главного Государственного санитарного врача Российской Федерации №4 от 28.01.2021.
3. Terrault N.A., Bzowej N.H., Chang K-M., et al. AASLD guidelines for treatment of chronic hepatitis B. /Hepatology. 2016 Jan; 63(1):261-283.
4. Wilkins T., Sams R., Carpenter M. Hepatitis B: Screening, Prevention, Diagnosis, and Treatment. /Am Fam Physician. 2019 Mar 1; 99(5):314-323.