ДНК вируса простого герпеса тип 1, 2 в пробе пациента — показатель инфицирования ВПГ 1 и/или 2 типа, репликации вируса, ВПГ-инфекции.

Вирус простого герпеса (ВПГ) относится к роду Simplexvirus. Источник инфекции – больной или вирусоноситель. Герпетическая инфекция очень распространена, ее носителями является половина населения Земли. ВПГ передаётся преимущественно контактным путем (с везикулярной жидкостью, при поцелуях – со слюной, половых контактах), через предметы обихода, воздушно-капельным путем, через плаценту, при рождении ребенка. Возможна реактивация вируса при снижении иммунитета (рецидивирующий герпес). Различают первичный герпес и рецидивирующий герпес. Чаще вирус вызывает бессимптомную или латентную инфекцию. Ранее считалось, что ВПГ 1 типа вызывает назолабиальный герпес, а ВПГ 2 типа – генитальный, но в настоящее время установлено, что оба возбудителя могут вызывать герпетические поражения той или другой локализации.

Этиологическая лабораторная диагностика ВПГ-инфекции включает в себя выделение и идентификация вируса в культуре клеток, микроскопическое исследование, выявление ДНК возбудителя и определение специфических IgM- и IgG-антител.

При определении ДНК ВПГ методом ПЦР материалом для исследования может быть: содержимое/отделяемое везикул, пустул и/или эрозивно-язвенных поражений слизистых оболочек, кожи и других локусов (носоглотка, уретра, влагалище, цервикальный канал, конъюнктива); СМЖ; моча; мазки (соскобы) со слизистых оболочек носоглотки, полости рта, уретры, влагалища, цервикального канала, конъюнктивы (при отсутствии видимых везикулезных, пустулезных высыпаний или эрозивно-язвенных поражений); сыворотка или плазма крови.

Обнаружение ДНК ВПГ-1/2 в различном биологическом материале при использовании метода ПЦР превосходит чувствительность обнаружения ВПГ при использовании вирусологического исследования. Обнаружение ДНК ВПГ в мазках, соскобах со слизистых оболочек ротовой полости, урогенитального тракта; в содержимом/отделяемом везикул, пустул и эрозивно-язвенных поражений кожи и слизистых оболочек; СМЖ (по показаниям) с помощью ПЦР является методом выбора. При этом несомненную ценность имеет количественное определение ДНК ВПГ методом ПЦР Real time, полученные результаты исследования можно использовать как с диагностической целью, так и для оценки активности инфекционного процесса и эффективности проводимой терапии.

Обнаружение ДНК ВПГ-1/2 методом ПЦР позволяет при однократном тестировании пуповинной крови установить факт внутриутробного инфицирования плода; а при проведении обследования в первые 24-48 часов после рождения лабораторно подтвердить врожденную инфекцию, вызванную ВПГ.

Обнаружение ДНК ВПГ свидетельствует о наличии активной (репликативной) стадии герпетической инфекции с учетом выраженности клинических проявлений. Следует отметить, что исследование, направленное на обнаружение ДНК ВПГ в периферической крови иммунокомпетентных пациентов в подавляющем большинстве случаев мало информативно, что обусловлено кратковременностью периода гематогенной диссеминации ВПГ, и, следовательно, возможностью получения ложноотрицательного результата анализа, несмотря на развитие клинически выраженного заболевания.

• Заболевания мочеполовых органов.
• Планирование беременности.
• Признаки внутриутробной ВПГ-инфекции.
• Жжение, боль, пузырьковые герпетиформные высыпания и отечность в области урогенитального тракта.
• Мониторинг противовирусной терапии
• Профилактические скрининговые исследования.

Специальной подготовки не требуется. Перед взятием материала из уретры рекомендуется не мочиться в течение 1,5-2 часов. Недопустимо забирать материал из влагалища, уретры, шейки матки у женщин во время месячных.

• Соскоб из уретры – Перед взятием материала наружное отверстие уретры обработать тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором. Провести массаж уретры. Далее ввести зонд в уретру (у женщин на глубину 1 – 1,5 см., у мужчин на глубину 3 – 4 см.). Осторожно собрать материал вращательными движениями. Извлечь зонд и поместить его рабочую часть в пробирку с транспортной средой, аккуратно прополоскать в среде для отделения материала, отжать остатки среды о стенки пробирки, зонд удалить, пробирку закрыть, защёлкнув замок. Обязательно указать в направлении Ф.И.О. пациента, номер пробирки, вид материала и необходимое исследование. До передачи курьеру, материал может храниться в холодильнике при температуре + 2 - +8ºС.
• Соскоб из влагалища – Погрузить рабочую часть зонда в вагинальное отделяемое заднего свода влагалища и, вращая зонд, максимально набрать материал. Извлечь зонд и поместить его рабочую часть в пробирку с транспортной средой, аккуратно прополоскать в среде для отделения материала, отжать остатки среды о стенки пробирки, зонд удалить, пробирку закрыть, защёлкнув замок. Обязательно указать в направлении Ф.И.О. пациента, номер пробирки, вид материала и необходимое исследование. До передачи курьеру, материал может храниться в холодильнике при температуре + 2 - +8ºС.
• Соскоб из цервикального канала – Удалить слизь с поверхности шейки матки стерильным тампоном, ввести зонд на глубину 0,5 – 1,5 см. в цервикальный канал и осторожно сделать два полных оборота по часовой и против часовой стрелки. Извлечь зонд, избегая касания стенок влагалища и поместить его рабочую часть в пробирку с транспортной средой, аккуратно прополоскать в среде для отделения материала, отжать остатки среды о стенки пробирки, зонд удалить, пробирку закрыть, защёлкнув замок. Обязательно указать в направлении Ф.И.О. пациента, номер пробирки, вид материала и необходимое исследование. До передачи курьеру, материал может храниться в холодильнике при температуре + 2 - +8ºС.

Соскоб из уретры, влагалища, цервикального канала

ПЦР Real time

Единицы измерения: Lg (копий/10⁵клеток)

ДНК Вируса простого герпеса (HSV) тип 1,2

• >0 Lg (копий/10⁵ клеток) - нфицирование вирусом простого герпеса (HSV) тип 1,2. (ВПГ-инфекция);
• 0 Lg (копий/10⁵ клеток) - нет инфицирования вирусом простого герпеса (HSV) тип 1,2.

Количество клеток в исследуемом образце достаточное для проведения анализа должно быть ≥ 4,0 Lg (копий/10⁵ клеток).

ДНК вируса простого герпеса не обнаружена: 0 Lg (копий/10⁵ клеток)

E335 Антитела к вирусу простого герпеса 1 и 2 типа IgG; E340 Антитела к вирусу простого герпеса 1 и 2 типа IgM; G041 Вирус простого герпеса (HSV) тип 1,2, обнаружение ДНК (количественно)

1. Домонова Э.А., Гущин А.Е. Инфекция, вызываемая вирусом простого герпеса. // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Акимкина В.Г., Твороговой М.Г. - Москва. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2020: 79-86.
2. Anderson N., Buchan B., Ledeboer N. Light microscopy, culture, molecular, and serologic methods for detection of herpes simplex virus // J Clin Microbiol. 2014. (52): 2-8.
3. Bernstein D., Bellamy A., Hook E. et al. Epidemiology, clinical presentation, and response to primary infection with herpes simplex virus type 1 and 2 in young women // Clin Infect Dis. 2013. (56): 344-351.