Мультиплексное ПЦР-исследование, используемое для выявления ДНК Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae by PCR; Neisseria meningitidis, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae методом ПЦР Real time в пробе пациента. Формат исследования — качественный.

Neisseria meningitidis (менингококк) относится к семейству Neisseriaceae, роду Neisseria, является возбудителем менингококковой инфекции. «Золотым стандартом» диагностики является выделение чистой культуры Neisseria meningitidis бактериологическим методом. Материалом для исследования являются мазки из носа, ротоглотки, пункционные жидкости, спинномозговая жидкость. Возможно выявлением менингококка в ликворе бактериоскопическим методом. Серологические методы (определение специфических антител к Neisseria meningitidis) носят вспомогательный характер при диагностике менингококковой инфекции. Возможно их использование при эпидемиологических исследованиях. В последнее время всё большее значение приобретает метод ПЦР, который позволяет обнаружить ДНК возбудителя в пробе пациента в течение 2-4 часов. Обнаружение ДНК Neisseria meningitidis менингококка методом ПЦР позволяет диагностировать до 100% случаев генерализованной менингококковой инфекции и проводить этиологическую расшифровку в 80-90%. На результат ПЦР-исследования не влияет прием антибиотиков. Определение ДНК менингококка методом ПЦР отличают высокая чувствительность и специфичность.

Haemophilus influenzae (палочка инфлюэнцы, палочка Пфейффера) относится к роду гемофилюсов (который включает 16 видов бактерий), вызывает гемофильную инфекцию и имеет большое значение в патологии человека. Диагноз гемофильной инфекции ставится с учётом возраста больного, наличием факторов, способствующих инфицированию гемофильной палочкой, характерных клинических проявлениях (целлюлиты, эпиглоттит и др.). Подтверждением диагноза служит выделение гемофильной палочки бактериологическим методом. Материалом для исследования может быть мазок из носа, мазок из ротоглотки, гной, мокрота, спинномозговая жидкость. Данный метод исследования достаточно длительный (3-5 дней). Более быстрый метод — определение ДНК возбудителя методом ПЦР.

Streptococcus pneumoniae являтся возбудителем стрептококковой пневмонии, встречается чаще у детей. Диагностика заболевания проводиться с учётом возраста больного, клинической картины и данных лабораторных исследований. Основным методом является бактериологический — выделение чистой культуры возбудителя в мазках из носа, ротоглотки, мокроты, бронхоальвеолярного лаважа. Наиболее быстрым методом постановки этиологического диагноза является метод ПЦР. Для обнаружения ДНК S. pneumoniae применяют ПЦР, в качестве мишеней используют специфические фрагменты генов, кодирующих факторы патогенности: пневмолизин (Ply), аутолизин (LytA), пневмококковый поверхностный АГ (PsaA), пневмококковый поверхностный протеин А (PspA), марганец-зависимая супероксиддисмутаза (sodA), поверхностный пенициллин-связывающий белок 2b (Pbp2b), локусы Spn9802, Spn9828. Все эти мишени могут использоваться для обнаружения ДНК S. pneumoniae в биологических жидкостях организма с целью диагностики инвазивных форм пневмококковой инфекции.

• Подозрение на внебольничную пневмонию, острый бронхит, отит, синусит
• Генерализованные формы инфекций – менингит, менингоэнцефалит, сепсис
• Эпидемиологические исследования

Специальной подготовки не требуется.

Мазок из носа, мазок из ротоглотки – Материал получают сухим стерильным ватным тампоном на палочке. После взятия материала поместить тампон в пробирку с транспортной средой, аккуратно прополоскать в среде для отделения материала, отжать остатки среды о стенки пробирки, тампон удалить, пробирку закрыть, указать на пробирке Ф.И.О. пациента и дату взятия материала. Обязательно указать в направлении Ф.И.О. пациента, номер пробирки, вид материала и необходимое исследование.

Мазок из носа, мазок из ротоглотки

ПЦР Real time

Единицы измерения: тест качественный

ДНК (наименование возбудителя):

• обнаружена: инфицирование данным возбудителем.
• не обнаружена: нет инфицирования данным возбудителем.

G076 Neisseria meningitidis, обнаружение ДНК; G176 Neisseria meningitidis, обнаружение ДНК; G178 Haemophilus influenzae, обнаружение ДНК; G179 Streptococcus pneumoniae; обнаружение ДНК; H175 Посев на N. meningitidis с определением чувствительности к антибиотикам

1. Миронов К.О. Менингококковая инфекция. // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Акимкина В.Г., Твороговой М.Г. - Москва. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2020: 263-270.
2. Миронов К.О., Яцышина С.Б. Инфекция, вызываемая Streptococcus pneumoniae. // Лабораторная диагностика инфекционных болезней. Под ред. Акимкина В.Г., Твороговой М.Г. - Москва. ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, 2020: 155-160.
3. Bijlmer H.A. World-wide epidemiology of Haemophilus influenzae meningitis; industrialized versus non-industrialized countries. /Vaccine. 1991 Jun: 9 Suppl:S5-9.
4. Carnalla-Barajas M.N., Soto-Nagueron A., Martinez-Medina L., et al. Diagnosis of bacterial meningitis caused by Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, and Haemophilus influenzae using a multiplex real-time PCR technique. /Braz J Microbiol. 2022 Dec; 53(4): 1951-1958.
5. Memish Z.A., Alrajhi A.A. Meningococcal disease. /Saudi Med J. 2002 Mar; 23(3):259-264.