Мультиплексное ПЦР-исследование, используемое для выявления и типирования ДНК/РНК возбудителей клещевых инфекций (клещевой энцефалит (TBEV), боррелиоз (Borrelia burgdorferi sl), анаплазмоз (Anaplasma phagocytophilum), эрлихиоз (Ehrlichia chaffeensis, Ehrlichia muris) в теле клеща. Формат исследования — качественный.

Клещевые инфекции, передающиеся иксодовыми клещами, характеризующиеся большим разнообразием клинических форм. В 30-е годы ХХ века был известен возбудитель клещевого энцефалита. В 1975 году в США в городке Лайм впервые были описаны случаи клещевого боррелиоза у детей с клиническими симптомами ювенильного ревматоидного артрита. Заболевание получило название болезни Лайма. В России болезнь Лайма включена в официальный перечень инфекционных болезней в 1991 году. Далее в 1998 году обнаружены моноцитарные эрлихии, в 2002 году выявлена заражённость клещей возбудителем ещё одного заболевания – анаплазмоза. Для всех этих заболеваний характерны единый механизм передачи, общий резервуар хозяев и переносчиков возбудителя. Было установлено, что клещи рода Ixodes оказались переносчиками многих микроорганизмов.

В данном исследовании определяются РНК/ДНК возбудителей следующих заболеваний:

Клещевой энцефалит (весенне-летний энцефалит, таёжный энцефалит, русский энцефалит, дальневосточный энцефалит, клещевой энцефаломиелит) – природно-очаговая вирусное инфекционное заболевание с трансмиссивным механизмом передачи возбудителя. Возбудитель вирус клещевого энцефалита: РНК-вирус рода Feavivirus, семейства Fogaviridae, группы Arvoviruses. Известны несколько антигенных вариантов и генотипов вируса.

Болезнь Лайма (иксодовый клещевой боррелиоз, системный клещевой боррелиоз, лайм-боррелиоз) – природно-очаговая инфекционная болезнь с трансмиссивным механизмом передачи возбудителя. Возбудитель – грамотрицательная спирохета комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato семейства Spirochaetaceae рода Borreliae. В. burgdorferi – самая крупная из боррелий.

Эрлихиозы (Ehrlichiosis) – группа острых зоонозных, главным образом трансмиссивных, инфекционных заболеваний, характеризующихся полиморфизмом клинических проявлений. Родовое название Ehrlichia было предложено в 1945 году Ш.Д. Мошковским в честь Пауля Эрлиха. Эрлихии – неподвижные грамотрицательные, риккетсиозоподобные организмы, облигатные внутриклеточные паразиты, размножающиеся бинарным делением, не образующие спор. Этиологическими агентами моноцитарного эрлихиоза считают два вида эрлихий – Е. chaffeensis и Е. Muris.

Гранулоцитарный анаплазмоз человека , называвшийся до 2004 года гранулоцитарным эрлихиозом человека, – это острое лихорадочное заболевание с полиморфной клинической картиной, возбудитель которого передается иксодовыми клещами. Возбудитель гранулоцитарного анаплазмоза Anaplasma phagocytophilum, относится к роду Anaplasma семейства Anaplasmataceae.

Клиническая картина клещевых инфекций имеет много общих черт и неспецифична. Как правило, заболевание манифестирует в виде гриппоподобного синдрома с лихорадкой, головной болью, миалгией и артралгией. Дифференцировать клещевые инфекции между собой и с другими острыми инфекционными заболеваниями на основании только лишь клинической картины заболевания невозможно. Некоторые иксодовые клещи инфицированы сразу двумя (реже тремя) патогенами (коинфекция) и могут приводить к развитию у одного и того же человека сочетанной инфекции. Чаще описаны случаи сочетанного боррелиоза и анаплазмоза.

Учитывая особенности клещевых инфекций, при укусе клеща, необходимо его удалить, поместить в контейнер и доставить в лабораторию для установления его инфицированности и вида возбудителя.

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – это один из методов молекулярной диагностики, позволяющий выявлять в теле клеща фрагменты генетического материала (ДНК или РНК) возбудителя инфекции. Это позволит установить инфицированность клеща и начать раннюю профилактику инфекции.

Установление инфицированности клеща и вида инфекции

Срециальной подготовки не требуется

Клеща необходимо поместить в чистый сухой эппендорф, наклеить штрихкод затем эппендорф поместить в чистый сухой пластиковый контейнер с плотно закручивающейся крышкой. контейнер поместить в Zip-пакет. Тщательно закрыть замок zip-lock. Хранить при температуре +2 - +8ºС.

Для ПЦР-диагностики пригодны клещи, как в живом, так и в неживом виде. Нельзя удалять клеща с помощью масла, спирта, лака для ногтей, антисептика, средств от насекомых и т.д. Важно сохранить целостность клеща, фрагменты в работу не берутся. Также необходимо в направлении указать следующие сведения:

• Дата укуса;
• Дата снятия;
• Количество клещей;
• Предполагаемая территория присасывания клеща;
• Адрес фактического проживания пациента.

Клещ

ПЦР Real time

Единицы измерения: тест качественный

В данном исследовании определяются РНК/ДНК следующих инфекций:

• РНК вируса клещевого энцефалита (TBEV)
• ДНК боррелии (Borrelia burgdorferi sl)
• ДНК эрлихиоза (Ehrlichia Chaffeensis и Ehrlichia muris)
• ДНК анаплазмоза (Anaplasma phagocytophilum)

Оценка результатов исследования:

• обнаружение РНК/ДНК возбудителя свидетельствует о инфицировании клеща данным возбудителем;
• отрицательный результат свидетельствует об отсутствии инфицированности клеща.

Отсутствуют

G082 Возбудители клещевых инфекций (ДНК/РНК) - 4 возбудителя: клещевой энцефалит (TBEV), боррелиоз (Borrelia burgdorferi sl), анаплазмоз (Anaplasma phagocytophilum), эрлихиоз (Ehrlichia chaffeensis и Ehrlichia muris)

1. Гинцбург А.Л., Злобин В.Н., ред. Природно-очаговые инфекции, передающиеся иксодовыми клещами. /М., 2013 – 464 с.
2. Korenberg E.I. Problems in the study and prophylaxis of mixed infections transmitted by ixodid ticks. /Int J Med Microbiol. 2004 Apr:293 Suppl 37:80-85.
3. Taba P., Schmutzhard E., Forsberg P., et al. EAN consensus review on prevention, diagnosis and management of tick-borne encephalitis. /Eur J Neurol. 2017 Oct; 24(10):1214-1261.
4. Vilibic-Cavlec T., Barbic L., et al. [TICK-BORNE ENCEPHALITIS VIRUS: EPIDEMIOLOGICAL AND CLINICAL PICTURE, DIAGNOSIS AND PREVENTION]. /Acta Med Croatica. 2014 Dec; 68(4-5):393-404.