Посев кала на Clostridioides difficile – основной метод выявления возбудителя антибиотикоассоциированных диарей и псевдомембранозного энтероколита.

Clostridioides difficile — грамположительные спорообразующие строго анаэробные бактерии, относятся к роду Clostridium. Clostridioides difficile входит в состав нормальной микрофлоры кишечника. Clostridioides difficile при посеве кала выделяется примерно у 50% новорожденных и у 3–15% здоровых детей старше 2-х лет и взрослых. Количество Clostridioides difficile в составе нормальной микрофлоры не превышает 105 КОЕ/г фекалий. Clostridioides difficile обладает природной устойчивостью к большинству антибиотиков и способны длительное время сохраняться во внешней среде. Споры Clostridioides difficile устойчивы к тепловой обработке. Около 75% штаммов Clostridioides difficile являются токсигенными, то есть способными вырабатывать экзотоксины, среди них наиболее изученными являются токсин A (энтеротоксин) и токсин B (цитотоксин).

Токсигенные штаммы Clostridioides difficile способны вызывать, так называемые антибиотикоассоциированные диареи и псевдомембранозный колит. Основным фактором, способствующим развитию этих заболеваний является приём антибактериальных препаратов, причём частота возникновения заболеваний больше зависит от типа препарата, а не от дозы приёма. Наиболее часто заболевание возникает после приёма клиндамицина, цефалоспоринов, ампициллина. Возникновение заболевания обусловлено тем, что антибиотики подавляют не только патогенную, но и нормальную микрофлору кишечника. Нормальная микрофлора в обычных условиях не даёт размножаться патогенным и условно-патогенным микроорганизмам, при её подавлении кишечник может колонизироваться устойчивыми к антибиотикам штаммами Clostridioides difficile, присутствовавшими в кишечнике в небольшом количестве, или при заражении токсигенными штаммами попавшими из вне с пищей и при контакте с бактерионосителями (фекально-оральный путь заражения). Фактором риска также является продолжительное пребывание больного в стационаре, особенно в одной палате с носителями Clostridioides difficile.

Антибиотикоассоциированные диареи являются осложнением антибактериальной терапии и встречаются у 5–25% пациентов, принимающих антибиотики. Clostridioides difficile при антибиотикоассоциированных диареях высевается примерно в 30-40% случаев, возбудителями заболевания могут быть также Salmonella spp., Clostridium perfringens тип A, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, грибы рода Candida и другие микроорганизмы. Заболевание является одной из наиболее частых внутрибольничных инфекций. Клинические проявления антибиотикоассоциированных диарей разнообразны — от лёгкой диареи до тяжёлого энтероколита (псевдомембранозный колит). Летальность при псевдомембранозном колите, при отсутствии лечения составляет от 15 до 30%. Возбудителем псевдомембранозного колита в большинстве случаев является Clostridioides difficile. Особенностью инфекции Clostridioides difficile являются ее частые рецидивы (в среднем 20–25%), причиной которых является нахождение в кишечнике спор Clostridioides difficile или повторное заражение. Основной метод диагностики заболевания — культуральное исследование кала.

• Кишечная инфекция не ясной этиологии.
• Кишечная инфекция у больных, принимавших антибиотики.
• Антибактериальная терапия.
• Выявление носителей Clostridioides difficile.
• Контроль эффективности лечения инфекции Clostridioides difficile.

В течение 3 дней до взятия материала не принимать антибактериальные препараты, острую пищу и алкоголь. От момента последнего приёма пищи до взятия материала должно пройти не менее 8-10 часов.

Кал для исследований собирается в стерильный контейнер с ложечкой (СКЛ). До сбора кала пациенту необходимо помочиться в унитаз. Далее путём естественной дефекации в унитаз или подкладное судно собирают испражнения. Затем кал забирается ложечкой в стерильный контейнер (СКЛ), материал необходимо брать из участков, где обнаруживается слизь или кровь.Завинтить крышку контейнера. Указать на этикетке Ф.И.О. пациента, дату, время сбора материала. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС. Время доставки в лабораторию не более 24 часов.

Кал

При оценке результатов исследования необходимо проведение 2-х кратных исследований с интервалом 1-2 дня. Выделение чистой культуры Clostridioides difficile свидетельствует о возможной этиологической роли микроорганизма в развитии заболевания. Для окончательного принятия клинического решения в отношении этиологической роли Clostridioides difficile необходимо провести дополнительное исследование: исследование на токсины ”A” и “B” Clostridioides difficile.

H095 Исследование на токсины “A” и “B” Clostridioides difficile

1. Ивашкин В.Т., Ляшенко О.С., Драпкина О.М., и др. Практические рекомендации Научного сообщества по содействию клиническомуизучению микробиома человека, Российской гастроэнтерологической ассоциации и Российского общества по профилактике неинфекционных заболеваний по диагностике и лечению Clostridioides difficile (C. difficile)-ассоциированной болезни у взрослых. /Рос журн гастроэнтерол гепатол колопроктол 2023; 33(3): 85-119.
2. Kordus S.L., Thomas A.K., Lacy D.B. Clostridioides difficile toxins: mechanisms of action and antitoxin therapeutics. /Nat Rev Microbiol. 2022 May; 20(5):285-298.
3. Reigadas E., Prehn J., Falcone M., et al. How to: prophylactic interventions for prevention of Clostridioides difficile infection. /Clin Microbiol Infect. 2021 Dec; 27(12):1777-1783.
4. Sandhu B., McBride S. Clostridioides difficile. /Trends Microbiol. 2018 Dec; 26(12):1049-1050.