Определение чувствительности к бактериофагам – проводиться для определения чувствительности выделенного возбудителя к бактериофагам.

В настоящее время во всем мире отмечается тенденция к росту устойчивости бактерий к антибиотикам. В сложившихся условиях одним из эффективных компонентов борьбы с формирующейся антибиотикорезистентностью является применение альтернативных антибактериальных препаратов — бактериофагов. Бактериофаги - это бактериальные вирусы избирательно поражающие бактерии. Существует бактериофаг стафилококковый, стрептококковый, сальмонеллёзный, синегнойный, протейный и др. Бактериофаги широко применяются при лечении бактериальных инфекций различной локализации.

В настоящее время российская медицинская промышленность производит препараты бактериофагов для борьбы с инфекционными заболеваниями, вызванными патогенными и условно-патогенными возбудителями. Бактериофаги по характеру взаимодействия с бактериальной клеткой делятся на вирулентные и умеренные. Взаимодействие вирулентного фага с бактериальной клеткой протекает в несколько этапов и обычно заканчивается лизисом (гибелью) последней и выходом из лизированной клетки новых зрелых фагов в окружающую среду. Успех фаготерапии напрямую зависит от эффективности применяемых препаратов. Одним из ключевых критериев успешной фаготерапии является использование вирулентных бактериофагов, обладающих полным лизисом бактерии – возбудителя инфекционного заболевания. Умеренные фаги, в отличие от вирулентных, обычно не вызывают гибели бактериальных клеток и при взаимодействии с ней переходят в особую форму, называемую профагом. В отличие от генома вирулентного фага, функция которого определяет активную репродукцию, профаг воспроизводится как часть бактериальной ДНК и синхронно с ней реплицируется. Бактериальные клетки, содержащие в своем геноме профаг, называются лизогенными. Одной из особенностей лизогенных бактерий является приобретенная ими устойчивость к последующему инфицированию аналогичным фагом.

Перед назначением препарата бактериофага, для решения вопроса о чувствительности к нему возбудителя, необходимо проводить оценку литических свойств фага в лабораторных условиях. Определение чувствительности микроорганизмов к бактериофагам проводят при необходимости их использования в лечебных и/или профилактических целях. По результатам исследования чувствительности микроорганизмов к бактериофагам выдают ответ о наличии или отсутствии чувствительности конкретного микроорганизма, выделенного из биоматериала конкретного пациента, к испытуемому бактериофагу с указанием его производителя, даты выпуска и номера серии.

• Назначение фаготерапии.

Взятие биоматериала на исследование должно проводиться до применения антибиотиков и других химиотерапевтических препаратов или после их отмены через 2-3 дня.

Материал забирается стерильным тампоном в специальные пробирки с угольной транспортной средой (СПТС), на пробирках помечают Ф.И.О. пациента, дату, время и место взятия материала. До передачи курьеру пробирки с материалом хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС. Время доставки в лабораторию не более 24 часов.

Отделяемое глаз, ушей, верхних дыхательных путей

Оценка литической активности фага проводиться по пятибалльной шкале (по количеству «крестов»):

• «-» отсутствие литической активности;
• «+» низкая активность;
• «++» образование зоны лизиса с большим количеством колоний вторичного роста бактерии;
• «+++» зона лизиса с единичными колониями вторичного роста;
• «++++» прозрачная зона лизиса без колоний вторичного роста.

Крайне важным является использование исключительно вирулентного (высокоактивного) препарата. В этой связи, решение вопроса о применении фага для лечения бактериальной инфекции должно базироваться на результатах тестирования активности препарата в лаборатории. При назначении бактериофага допускается использование препарата, обладающего литической активностью не менее «++++».

В зависимости от полученных результатов в заключении указывается степень чувствительности конкретного микроорганизма к действию конкретного бактериофага:

• Исследуемый микроорганизм чувствителен к бактериофагу (название бактериофага, производитель, серия, дата выпуска/или срок годности) – в месте нанесения фага наблюдается сплошная негативная колония;
• Исследуемый микроорганизм слабо чувствителен к бактериофагу (название бактериофага, производитель, серия, дата выпуска/или срок годности) - в месте нанесения фага наблюдаются отдельные негативные колонии фагов или рост отдельных колоний бактерий на фоне негативной колонии фага;
• Исследуемый микроорганизм не чувствителен к бактериофагу (название бактериофага, производитель, серия, дата выпуска/или срок годности) – полное отсутствие следов лизиса.

Решение вопроса о применении препарата фага для лечения у пациента должно приниматься лечащим врачом после получения результата исследования из лаборатории с указанием возбудителя и данных о его чувствительности к бактериофагу. Бактериофаг допустим к применению только при его высокой литической активности, гарантирующей полный лизис возбудителя в очаге инфекции. Фаготерапию можно применять как самостоятельный метод лечения, так и в сочетании с другими антибактериальными препаратами.

H140 Посев на аэробные и факультативно-анаэробные бактерии с определением чувствительности к антибиотикам; H180 Посев на анаэробные бактерии с определением чувствительности к антибиотикам

1. Петрухина А.Т., Блинова Е.И. Бактерийные и вирусные препараты./ «Академия Естествознания», 2010. 241 с.
2. Chen Q., Dharmaraj T., Cai P.C., et al. Bacteriophage and Bacterial Susceptibility, Resistance, and Tolerance to Antibiotics. /Pharmaceutics. 2022 Jul 7; 14(7):1425.
3. Day M. Bacterial sensitivity to bacteriophage in the aquatic environment. /Sci Prog. 2004; 87(Pt 3):179-191.