Комплексное исследование, позволяющее выявить полиморфизмы генов (MTHFR (677 C>T (A222V)), MTHFR (1298 A>C (E429A)), MTR (2756 A>G (D919G)), MTRR (66 A>G (I22M), ассоциированных с нарушениями фолатного цикла.

Фолатный цикл – каскадный процесс, контролируемый ферментами, которые в качестве коферментов имеют производные фолиевой кислоты. Ключевым этапом в данном процессе является синтез метионина из гомоцистеина. Это достигается в процессе превращения фолатов: восстановления 5,10-метилентетрагидрофолата до 5-метилтетрагидрофолата, несущего метильную группу, которая необходима для превращения гомоцистеина в метионин. Восстановление фолатов происходит при участии фермента метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR). Метильная группа переносится на B12, который затем отдает ее гомоцистеину, образуя метионин с помощью фермента метионин-синтазы (MTR). Однако в некоторых случаях В12 может окисляться, что приводит к подавлению метионин-синтазы. Для поддержания активности фермента необходимо восстановительное метилирование с помощью фермента метионин-синтаза-редуктазы (MTRR).

Нарушение фолатного цикла приводит к накоплению гомоцистеина в клетках и повышению общего уровня гомоцистеина в плазме. Гомоцистеин обладает выраженным токсическим, атерогенным и тромбофилическим действием, что обусловливает повышенный риск развития ряда патологических процессов:

• осложнения беременности (фетоплацентарная недостаточность, преждевременная отслойка нормально расположенной плаценты, поздний гестоз);
• дефекты развития плода (незаращение нервной трубки, анэнцефалия, деформации лицевого скелета);
• пренатальная смерть плода;
• эктопия хрусталика;
• остеопороз;
• канцерогенез (колоректальная аденома, рак молочной железы и яичников);
• усиление побочных эффектов при химиотерапии;
• сердечно-сосудистые заболевания (ишемическая болезнь сердца, инфаркт миокарда, атеросклероз, атеротромбоз).

Роль генетически обусловленных нарушений метаболизма фолатов была доказана для пациентов с инфарктом миокарда и ишемическим инсультом, была показана дозозависимая связь между генотипом MTHFR C667T и риском развития инсульта / транзиторной ишемической атаки (гетерозиготы (генотип MTHFR 667 СT): ОR 1,17; гомозиготы (генотип MTHFR 667 ТT): ОR 1,37). В группе томографически подтвержденного ишемического инсульта была выявлена более сильная ассоциация (гетерозиготы: ОR 1,18; гомозиготы: ОR 1,48). На сегодняшний день генетически обусловленное снижение активности ферментов фолатного цикла и цикла метаболизма гомоцистеина в отсутствие коррекции уровня фолатов в организме связывают с риском развития сердечно-сосудистых заболеваний именно с точки зрения гипометилирования ДНК. Изменение уровня метилирования затрагивает гены, связанные с широким спектром патологий, которые составляют сердечно-сосудистый континуум. Гипо- или гиперметилирование этих генов обнаружено в пораженных участках сосудистой стенки и атеросклеротических бляшках по сравнению с неизмененными участками сосудов. Тем не менее следует отметить, что само по себе носительство условно «неблагоприятных» аллельных вариантов генов ферментов фолатного цикла повышает риск сердечно-сосудистых заболеваний в случае отсутствия коррекции уровня фолатов в организме. 

Особую актуальность генетические дефекты фолатного цикла имеют с точки зрения развития репродуктивных проблем и пороков развития плода. Ассоциация генетических полиморфизмов ферментов фолатного цикла доказана при осложнениях беременности: фетоплацентарной недостаточности, преэклампсии, преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты, замершей беременности, внутриутробной гибели плода. Установлено, что при гомозиготном варианте полиморфизма гена MTHFR C677T количество репродуктивных потерь в два раза больше по сравнению с носительницами гетерозиготного варианта, причем у большинства женщин отмечаются потери в I триместре. У пациенток с беременностью, осложненной плацентарной недостаточностью, задержкой внутриутробного развития, антенатальной гибелью плода, гипергомоцистеинемия, ассоциированная с гомозиготным вариантом 677 ТТ, определялась в 22% случаев.  Примечательно, что дефекты генов ферментов фолатного цикла играют роль не только в репродуктивных проблемах у женщин, но и ассоциированы с бесплодием у мужчин, необструктивной азооспермией и олигозооспермией. У мужчин с высоким содержанием анеуплоидных сперматозоидов в эякуляте частота генотипов с полиморфными аллелями генов фолатного цикла в четыре раза выше, чем у мужчин с нарушениями фрагментации ДНК, что свидетельствует о нарушениях нормального расхождения хромосом в оогенезе при наличии генотипов, обусловливающих изменения фолатного обмена. Основную причину нарушения сперматогенеза связывают именно с гипометилированием ряда генов, участвующих в пролиферации и созревании половых клеток. Причем патологические изменения связаны не только с преимущественно гомозиготным носительством полиморфизма MTHFR С677Т (аллельный вариант ТТ), но и генетически обусловленными нарушениями
генов ферментов МTR (A2756G) и MTRR (А66G), опосредующих превращение гомоцистеина в метионин.

Однако, если имеет место скрытый дефицит витамина В12, как правило, вследствие проблем с абсорбцией в кишечнике (мальабсорбция, гельминтозы и прочее), риск развития дефектов нервной трубки у плода многократно повышается. Для дефицита витамина В12 также характерна мегалобластная анемия, которая подвергается обратному развитию при назначении витамина В12 в суточной дозе 1 мкг. При этом назначение фолатов в такой ситуации может маскировать дефицит В12, поскольку исчезают признаки мегалобластной анемии. Поэтому, пока не исключена В12-дефицитная анемия, назначение фолиевой кислоты в дозах, превышающих 0,1 мг/сут, не рекомендуется (исключение — беременность и период лактации). В то же время изолированный дефицит витамина В12 может стать причиной не только развития дефекта нервной трубки, но и выраженных неврологических нарушений вследствие демиелинизации в центральной и периферической нервной системе. Исследования данной проблемы выявили, что снижение концентрации витамина В12 в материнской сыворотке крови с кратным увеличением риска рождения ребенка с дефектом нервной трубки.

Анализ полиморфизмов в генах фолатного цикла позволяет определить предрасположенность к указанным выше патологическим процессам и дает возможность своевременного принятия мер посредством назначения корректирующей терапии.

• Невынашивание беременности, гибель плода во 2 и 3 триместрах беременности.
• Рождение ребенка с изолированными пороками нервной трубки, сердца или урогенитального тракта.
• Плановая подготовка к беременности.
• Наличие ИБС, артериальной гипертонии, атеросклероза или атеротромбоза.
• Тромбоэмболия.
• Антифосфолипидный синдром.
• Семейная предрасположенность к онкологическим заболеваниям.
• Повышенный уровень гомоцистеина в крови (гипергомоцистеинемия).
• Назначение оральных контрацептивов и гормональной заместительной терапии.

Кровь на исследования рекомендуется сдавать натощак (не менее 8 часов после последнего приёма пищи).

Кровь берется в вакуумную пробирку с К2ЭДТА или К3ЭДТА (фиолетовая крышка). Для обеспечения правильного соотношения кровь/антикоагулянт пробирка должна заполняться точно до указанного объёма. Сразу после заполнения пробирку необходимо аккуратно перемешать поворачиванием на 180º  8 – 10 раз (Не встряхивать!).  Укажите на этикетке пробирки Ф.И.О. пациента, дату и время взятия материала.  Не центрифугировать! Пробирку необходимо отправить в лабораторию в день взятия материала. До передачи курьеру хранить в холодильнике при температуре +2 - +8ºС.

Кровь ЭДТА

Полимеразная цепная реакция (ПЦР)

Интерпретацию результатов исследования проводит лечащий врач. Интерпретация результатов исследования проводиться с учётом результатов данного исследования, анамнеза и клиники заболевания пациента и данных других исследований. На основании полученных данных врач, если это необходимо, назначит дополнительные исследования и консультацию врача-генетика. При необходимости можно дополнительно заказать L165R Заключение. Нарушения фолатного цикла и получить подробное заключение нашего врача-генетика.

B021 Гомоцистеин; B083 Липидограмма (холестерин, холестерин-ЛПВП, холестерин-ЛПНП, холестерин-ЛПОНП, триглицериды, коэффициент атерогенности (КА), атерогенный индекс плазмы (AIP)); B219 Витамин B6 (пиридоксин); B220 Витамин В12 (цианкобаламин); B225 Фолиевая кислота

1. Бицадзе В.О., Самбурова Н.В., Макацария Н.А., Мищенко А.Л. Фолатдефицитные состояния в акушерской практике и проблема их коррекции. /Акушерство. Гинекология. Репродукция. 2016; 10(1):18-49.
2. Masud R., Bagai H.Z. The communal relation of MTHFR, MTR, ACE gene polymorphisms and hyperhomocysteinemia as conceivable risk of coronary artery disease. /Appl Physiol Nutr Metab. 2017 Oct; 42(10):1009-1014.
3. Nazki F.H., Sameer A.S., Ganaie B.A. Folate: metabolism, genes, polymorphisms and the associated diseases. /Gene. 2014 Jan 1; 533(1):11-20.